ГОСТ 30425-97
обильно под центральной частью предметного стекла (на расстоянии от края 1—3 мм) сплошной массой или
в виде отдельных колоний, образуя пузырьки газ;! и (или) разрывы питательной среды.
Г.3.3 Посевы культуральной жидкости и (или) ее разведений в чашках Петри заливают средой Вильсон-
Блера или другой агаризованной средой, содержащей реактивы для определения сульфитрелуиируюшей спо
собности. Посевной материал и среду тщательно перемешивают. Посевы термостатируют в анаэробных
усло виях по Г.3.1 (или на застывшую поверхность питательной среды помешают предметное стекло по
Г.3.2) при температуре (37±1) ‘С нс более 72 ч. Сульфитрсдуиируюшис микроорганизмы образуют на среде
с сульфитами черные, коричневые колонии или колонии, вызывающие потемнение среды.
Г.3.4 Культуральную жидкость и (или) ее разведения переносят в стерильные пробирки (отдельную для
культуральной жидкости и каждого ее разведения). Посевы в пробирках заливают агаризованной питательной
средой лак, чтобы образовался столбик высотой 10—И см. Стерильной пинеткой перемешивают содержимое
засеянных пробирок так. чтобы в среде нс оставалось пузырьков воздуха.
Культуральную жидкость и (или) ее разведения, перенесенные в стерильные пробирки, можно высе
вать в трубки Всйона. Для этого в стерильную трубку Всйона набирают агаризованную питательную среду
температурой 50—60 *С и переносят в пробирку с культуральной жидкостью или се разведением. Той же
труб кой Всйона тщательно перемешивают содержимое пробирки и засасывают это содержимое в трубку
Всйона так, чтобы нс оставалось пузырьков воздуха в трубке Всйона (за исключением острого конна и
поверхности среды). Острый конец трубки Всйона запаивают в пламени горелки. Засеянные трубки Всйона
оставляют в вертикальном положении для застывания среды.
Посевы в пробирках или трубках Всйона термостатируют нс в анаэробных условиях при температуре
(30:1) ‘С. Рост микроорганизмов контролируют через 24—4S ч.
Анаэробные микроорганизмы растут в высоких столбиках среды на некотором расстоянии от поверхно
сти среды. Это расстояние зависит от окислительно-восстановительного потенциала питательной среды, необ
ходимого дтя роста микроорганизмов.
Г.3.5 При определении присутствия в посевах термофильных микроорганизмов посевы по Г.3.1—Г.3.4 тср-
х!осгатируют при температуре 55—62 £’С.
Г.4 Определение способности выделенных микроорганизмов к спорообразованию в анаэробных условиях
Пересевы культуральной жидкости из первичных посевов делают на жидкие (вязкие) или агаризованные
питательные среды. Посев на жидкие (вязкие) среды проводят с учетом требований 7.7.2 стандарта, а на
агаризованные — Г.З. При выборе сред учитывают, что некоторые Сахаровигические виды клостриднй не обра
зуют спор при отсутствии ферментируемых сахаров, но дтя спорообразования большинства других видов среда
не должна содержать ферментируемые сахара. Лучшими средами дтя спорообразования являются среды, при
готовленные на основе мясного бульона с кусочками мяса или сердца. При сомнении в наличии спор их
образование стимулируют прогревом вторичных посевов в течение 10 мин при температуре (80±1) “С дтя
термоустойчивых клостриднй и 10 мин при температуре (60±1) ’С дзя нетермоустойчивых клостриднй. Посевы
дтя наблюдения за спорообразованием термостатируют нс более 48 ч при температуре (30:1) ’С и затем
выдерживают нс более 3 сут при 20—25 ‘С. При необходимости, в процессе термосгатировання или выдержки из
посевов приготавливают по Г.2 мазки дтя обнаружения спор.
26913