ГОСТ Р ИСО 11737-2—2022
пропускают через мембранный фильтр. После этого либо питательную среду асептически переносят в блок филь
трации, либо мембранный фильтр асептически переносят в питательную среду.
Обе эти операции завершаются инкубацией.
А.6.6 Исследуемый продуктследует подвергнуть скринингу, чтобы определить, не выделяются ли в среду
какие-либо ингибирующие вещества, которые могут вызвать ложноотрицательный результат (см. А.7). Скрининг
осуществляется путем инокуляции небольшого количества репрезентативных организмов в среду, содержащую
продукт, и называется исследованием пригодности метода (или исследованием бактериостатичности/фунгистатич-
ности).
При обнаружении микробоцидных или микробостатических веществ их влияние может быть сведено к мини
муму путем:
a) добавления нейтрализатора(ов) в питательную среду или элюент;
b
) удаления микробоцидного или микробостатического вещества из элюата путем фильтрации;
c) снижения концентрации микробоцидного или микробостатического вещества до неэффективного уровня
путем разбавления.
П р и м е ч а н и е — Это достигается путем увеличения объема питательной среды или элюента и, при
необходимости, разделением продукта на несколько исследуемых контейнеров.
Микробоцидные или микробостатические вещества могут связываться с фильтрующими мембранами. Сле
дует позаботиться о том, чтобы обеспечить использование подходящих фильтрующих мембран, дабы свести к
минимуму вероятность связывания.
Руководство по процедурам, микроорганизмам, исследованию и времени инкубации для определения при
годности метода приведены в [31]—[34]. Однако температура инкубации и питательной среды должна быть такая же,
как и та, которая будет использоваться при проведении исследований на стерильность.
Следует предпринять несколько попыток, используя различные условия культивирования, чтобы устранить
или уменьшить ингибирующие вещества до такой степени, чтобы исключить неприемлемый риск. После много
кратных попыток, если ингибирующее вещество не устранено, целесообразно принять сокращение ингибирующих
веществ с сопутствующим обоснованием и оценкой риска.
А.6.7 Соответствующий международный стандарт по разработке, валидации и рутинному контролю процесса
стерилизации может рекомендовать размер выборки и определенные условия культивирования для использова
ния в исследовании на стерильность.
Как правило, выбирают один тип питательной среды исходя из предположения, что он будет оптимальным
для культивирования большинства аэробных и факультативных микроорганизмов, которые могли бы пережить
воздействие стерилизующего агента. При использовании соево-казеиновой питательной среды в качестве единой
питательной среды обычно используют условия культивирования при температуре (30 ± 2) °С в течение 14 дней.
При использовании другой питательной среды для проведения исследований на стерильность следует учитывать
соответствующие условия инкубации.
Температура инкубации, рекомендуемая для исследований на стерильность, может быть ниже рекомендуе
мой для определения уровня биологической нагрузки.
Выбор условий культивирования должен быть сделан, если:
- соответствующий международный стандарт по разработке, валидации и рутинному контролю процесса сте
рилизации не предусматривает использование питательной среды;
- использование одного набора условий культивирования нецелесообразно из-за типов микроорганизмов,
которые могут присутствовать на продукте и преодолевать воздействие стерилизующего агента (например, при
сутствие анаэробов или микобактерий).
Факторы, которые следует учитывать при выборе условий культивирования в этих случаях, должны включать
следующее:
- особенности продукта;
- способ изготовления;
- источники потенциальной микробиологической контаминации;
- типы микроорганизмов, с которыми можно столкнуться.
Информация о типах микроорганизмов, полученная в результате определения биологической нагрузки, вы
полненного в соответствии с ИСО 11737-1, может служить обоснованием выбора условий культивирования.
А.6.8 Интервал времени между воздействием стерилизующего агента и переносом в условия культивиро
вания следует свести к минимуму, чтобы ускорить восстановление микроорганизмов. Необходимо приложить все
усилия для проведения исследований на стерильность элементов продукции или ЧПИ и сделать это как можно бы
стрее после воздействия стерилизующего агента. Если задержка в переносе неизбежна, то условия, при которых
хранятся элементы продукции, выбирают таким образом, чтобы предотвратить потерю жизнеспособности микро
организмов или изменения микробной популяции.
А.6.9 Макроскопическое исследование обычно используют для изучения среды на рост после инкубации.
Признаки роста могут включать мутность, пленку, осадок, флокуляцию и изменение цвета. Как правило, когда из
делия положительно влияют на рост микроорганизмов, микроорганизм(ы) должен(ны) быть идентифицирован(ы).
9