ГОСТ 28420—2022
- пробирки энтомологические стеклянные;
- чашки Петри пластиковые или стеклянные;
- держатели (штативы) для пробирок конических микроцентрифужных с крышкой типа Эппен-
дорф вместимостью 1,5 см3;
- булавки энтомологические;
- иглы препаровальные;
- кисточку акварельную № 1;
- пинцет с прямыми острыми концами, длиной не более 150 мм.
11.2.2 При выделении ДНК из вредных организмов используют следующие средства измерений,
оборудование, реактивы, посуду и материалы:
- дозаторы одноканальные варьируемого объема (1—10; 20—200; 100—1000 мм3) в комплекте со
сменными одноразовыми наконечниками с фильтром или без фильтра;
- встряхиватель (шейкер) лабораторный для пробирок конических микроцентрифужные с крыш
кой типа Эппендорф вместимостью 1,5 см3;
- камеру морозильную, способную поддерживать температуру до минус 10 °С;
- камеру холодильную диапазоном температур от 2 °С до 8 °С;
- микроспектрофотометр;
- микроцентрифугу лабораторную для пробирок конических микроцентрифужные с крышкой типа
Эппендорф вместимостью 1,5 см3, со скоростью вращения не менее 13 000 об./мин;
- ПЦР-бокс;
- рециркулятор;
- термостат твердотельный для пробирок конических микроцентрифужных с крышкой типа Эппен
дорф вместимостью 1,5 см3диапазоном температур от 18 °С до 99 °С;
- набор реагентов для выделения ДНК;
- протеиназу К;
- раствор дезинфицирующий, вызывающий деградацию ДНК (например, хлорсодержащий);
- пробирки конические микроцентрифужные с крышкой типа Эппендорф вместимостью 1,5 см3;
- держатели (штативы) для пробирок конических микроцентрифужных с крышкой типа Эппен
дорф вместимостью 1,5 см3.
11.2.3 Допускается применение других средств измерений и посуды с метрологическими характе
ристиками, оборудования и материалов с техническими характеристиками, а также реактивов по каче
ству не хуже указанных.
11.3 Подготовка вредных организмов к выделению ДНК
11.3.1 Насекомое помещают с помощью пинцета в чашку Петри и разрушают его с помощью эн
томологических булавок или препаровальных игл, затем необходимую часть (см. 11.1.5) переносят с
помощью пинцета в пробирку вместимостью 1,5 см3, пробирку закрывают и маркируют в соответствии с
5.3.4.
Фрагмент насекомого (см. 11.1.5) переносят с помощью пинцета в пробирку вместимостью 1,5 см3,
пробирку закрывают и маркируют в соответствии с 5.3.4.
Клеща переносят с помощью энтомологических булавок или дозатора в пробирку вместимостью
1,5 см3, пробирку закрывают и маркируют в соответствии с 5.3.4.
11.3.2 Насекомых, их фрагменты или клещей растирают в пробирке с помощью гомогенизатора
(пестика).
Клещей также можно разместить в капле 70 %-ного раствора этилового спирта на стенке пробирки
и растереть с помощью энтомологической булавки.
11.4 Выделение ДНК из вредных организмов
11.4.1В пробирку с насекомым, его фрагментом или клещом добавляют 20 мм3буферного раство
ра из набора реагентов для выделения ДНК в соответствии с инструкцией изготовителя.
В случае необходимости выделения ДНК из насекомых и клещей без их разрушения (например,
для последующей идентификации морфологическим методом или для хранения в справочной коллек
ции) к необходимому фрагменту насекомого или клещу добавляют 300 мм3буферного раствора из на
бора реагентов для выделения ДНК в соответствии с инструкцией изготовителя с добавлением 1 мм3
меркаптоэтанола и 10 мм3 раствора протеиназы К.
57