ГОСТ 28420—2022
После мацерации образцы помещают в уксусную кислоту для нейтрализации гидроокиси калия
(гидроокиси натрия) и промывают дистиллированной или кипяченой водой.
Примечание — Допускается замена промывания в уксусной кислоте дополнительным промыванием в
дистиллированной воде.
Для мацерации вредных организмов семейств Thripidae (Трипсы), Aleyrodidae (Белокрылки) и
Diaspididae (Щитовки) допускается использование молочной кислоты вместо 10 %-ного раствора гидро
окиси калия (гидроокиси натрия).
г) Правила проведения отбеливания
Темноокрашенных насекомых помещают в свежеприготовленную смесь 10 %-ного раствора ги
дроокиси аммония и 3 %-ного раствора перекиси водорода в соотношении 1:6. Отбеливание непрерыв но
контролируют под стереомикроскопом, при необходимости добавляют несколько капель 50 %-ного
раствора молочной кислоты (см. Б.11, приложение Б) для того, чтобы его прекратить. После отбелива ния
насекомое промывают дистиллированной водой.
д) Правила удаления воскового слоя
Для удаления воскового слоя взрослых самок семейств Diaspididae (Щитовки), Pseudococcidae
(Мучнистые червецы) и восковых ложнощитовок рода
Ceroplastes
помещают в смесь фенола и ксилола в
соотношении 1:1 или фенола и Histo-Clear (см. Б.12, приложение Б) в соотношении 1:1, в фарфоро вом
тигле или ином подходящем сосуде. Сосуды нагревают на нагревательном столике, не доводя до
кипения, в течение 3—5 мин.
Примечание — Допускается поместить объект исследования в сосуд с абсолютным спиртом (см. Б.13,
приложение Б) на 1мин без нагревания.
После удаления воскового слоя насекомых промывают дистиллированной водой.
е) Правила проведения окрашивания
Для окрашивания насекомых семейств Aleyrodidae (Белокрылки),Diaspididae (Щитовки),
Pseudococcidae (Мучнистые червецы) и восковых ложнощитовок рода
Ceroplastes
применяют кислый
фуксин (см. Б.14, приложение Б).
Для окрашивания мелких гусениц семейств Gelechiidae (Выемчатокрылые моли), Tineidae (Насто
ящие моли) и Tortricidae (Листовертки) применяют хлоразол черный.
Для уменьшения интенсивности окрашивания объекты исследования на 5—10 мин помещают в
95 %-ный раствор этилового спирта (см. Б.2, приложение Б). Процесс окрашивания контролируют под
стереомикроскопом.
Примечание — В случае использования при исследовании микроскопа с фазово-контрастным устрой
ством, допускается исключение этапа окрашивания.
10.3.3.4 Приготовление плоских микропрепаратов
Для приготовления тотального микропрепарата объект исследования переносят в каплю жидко
сти Хойера, Фора — Берлезе или их аналогов в центре предметного стекла. Перед тем, как накрыть
покровным стеклом, под стереомикроскопом необходимо расправить тело насекомого (клеща) и от
дельные его части так, чтобы диагностические признаки были хорошо различимы.
Каплю с объектом исследования оставляют до 30 мин до слабого загустения. На внутреннюю сто
рону покровного стекла добавляют каплю свежей жидкости Хойера, Фора — Берлезе или их аналогов,
ставят его ребром на предметное стекло и осторожно опускают на объект исследования. Такой способ
позволяет полностью заполнить жидкостью пространство под покровным стеклом, удалив пузырьки
воздуха, и расположить объект исследования в центре покровного стекла.
Для приготовления микропрепарата гениталий насекомых в смеси глицерина и желатина фраг
мент застывшей смеси помещают на предметное стекло с лункой и подогревают на нагревательном
столике до расплавления. В каплю помещают гениталии, осторожно расправляют, накрывают покров
ным стеклом и снова подогревают, чтобы жидкость заполнила все пространство под покровным сте
клом.
Микропрепараты могут быть исследованы под микроскопом через 2—3 ч после приготовления,
полного высыхания при этом еще не происходит.
55