ГОСТ 34105—2017
Таблица 2
Компоненты реакции
При массовом исследованииПри исследовании в двух разведениях
пробирки с исследуемыми
сыворотками (разведение)
пробиркидля каждой исследуемом
сыворотки (разведение)
Н1:б)
1(1 5)2(1:5)
3(1:10)
Исследуемая сыворотка, см30.05
0.10.2
0.1
0.85 %-ный раствор хлористого натрия, см30.2
0.4—
0.1
Водяная баня 30 мин при 58 ’С—65 "С
0.85 %-ный раствор хлористого натрия, см3—
0,2——
Антиген в рабочем разведении, см30.2
—0,20.2
Комплемент в рабочем разведении, см30.2
0.20.20.2
Водяная баня 20 мин при 37 ’С—38 ’С
Гемолитическая система, см30.40.40.40.4
Водяная баня 20 мин при 37 "С — 38 "С
П р и м е ч а н и е — Допускается смешивание равных объемов рабочих разведений антигена и комплемен
та непосредственно перед внесением в пробирки.
При постановке реакции ставят следующие контроли:
- негативной и бруцеллезной сывороток в разведении 1:5 и 1:10 с антигеном и 1:5 без антигена (по
схеме реакции),
- гемолитической системы (0,4 см3 гемолитическойсистемы и 0,6 см30,85 %-ного раствора хлори
стого натрия) — полная задержка гемолиза:
- комплемента (0,2 см3комплемента в рабочем разведении, 0.4 см30.85 %-ного раствора хлори
стого натрия и 0,4 см3 гемолитической системы) — полный гемолиз;
- антигена (0,2 см3антигена в рабочем разведении. 0.2 см3комплемента в рабочем разведении,
0,2 см3 0,85 %-ный раствор хлористого натрия и 0.4 см3 гемолитической системы) — полный гемолиз.
При необходимости определения титра исследуемых проб сыворотки, разведения готовят следу
ющим образом: в пробирки первого ряда (разведение 1:5) вносят по 0.8 см30,85 %-ного раствора хло
ристого натрия, 0.2 см3пробы сыворотки и смешивают пипетированием. В пробирки третьего, четверто го,
пятого и шестого рядов вносят по 0.2 см30,85 %-ного раствора хлористого натрия. Пробы сыворотки из
первого ряда пробирок вносят по 0.2 см3в пробирки второго и третьего рядов. В пробирках третьего ряда
сыворотку смешивают, получая разведение 1:10; 0.2 см3разведения сыворотки вносят в пробирки
четвертого ряда, смешивают, получая разведение 1:20. и так далее до шестого разведения 1:80. Из
пробирок последнего ряда по 0.2 см3 разведений сыворотки удаляют. В пробирки второго ряда вносят по
0,2 см30.85 %-ного раствора хлористого натрия (ряд без внесения антигена — контроль антикомлле-
ментарных свойств сыворотки). Постановку реакции проводят по схеме, представленной в таблице 2.
7.5.5 Реакция длительного связывания комплемента на холоде (РДСК)
7.5.5.1 Подготовка к исследованию
Сыворотки исследуют в разведениях 1:5 и 1:10 с антигеном и в разведении 1:5 без антигена (кон
троль на антикомплементарностъ сыворотки), при массовом исследовании реакцию проводят в одной
пробирке в разведении сыворотки 1:5 с антигеном. Инактивирование разведенных сывороток крови и
приготовление гемолитической системы проводят no 7.5.3.3.
Комплемент применяют в рабочем разведении 1:25 или 1:20 прититре 0.06—0.1 или в разведении
1:20—1:15 при титре 0,1—0,14.
Одновременно определяют титр гемолитической системы с использованием свежей или консер
вированной сыворотки по схеме, приведенной в таблице 3.
Учет результатов титрования проводят немедленно после выемки штатива из водяной бани.
12