ГОСТ 34105—2017
При получении отрицательных результатов КР по всему стаду его считают благополучным по бру
целлезу.
Сыворотку крови животных стада (группы, населенного пункта), в котором выявлены особи, со
мнительно или положительно реагирующие в КР. исследуют на бруцеллез в РБП, или в РА и РСК (РДСК),
или в РА и РИД. или в РИГА, или в ИФА. При этом проводят клинический осмотр животных и исключают их
заболевание маститами.
7.4 Реакция агглютинации (РА) в пробирках
7.4.1 РАв пробирках с бруцеллезным антигеном применяют при диагностике бруцеллеза крупного
рогатого скота (буйволов, яков. зебу), овец. коз. лошадей, верблюдов, оленей (маралов), собак, пушных
зверей и морских свинок.
7.4.2 Приготовление фенолизированных растворов хлористого натрия с содержанием фе
нола 0,5 %
В 1дм3 дистиллированной воды растворяют соответственно 8.5, 50 и 100 г хлористого натрия и до
бавляют к каждому раствору по 5 г фенола. Растворы фильтруют дважды через бумажный фильтр. Раство
ры хранят в стеклянных бутылях. укупоренных резиновыми пробками при температуре от 2 еС до 20 еС. и
используют в течение 1 мес.
7.4.3 Проведение исследования
7.4.3.1 При исследовании в РА сыворотки крови крупного рогатого скота, лошадей, верблюдов,
собак, пушных зверей и морских свинок и антиген разводят фенолизированным 0.85 %-ным раствором
хлористого натрия по 7.4.2; овец и коз — фенолизированным 5 %-ным раствором хлористого натрия по
7.4.2; оленей (маралов) — фенолизированным 10 %-ным раствором хлористого натрия по 7.4.2.
7.4.3.2 Сыворотки крови исследуют в четырех разведениях в пробирках Флоринского в объеме 1 см3:
- для крупного рогатого скота, лошадей и верблюдов — в разведениях 1:50.1:100.1:200 и 1:400;
- для овец. коз. оленей (маралов) и собак — в разведениях 1:25.1:50.1:100 и 1:200;
- для собак с /?-бруцеллезным антигеном (B.canis) — в разведениях 1:50.1:100,1:200 и 1.400;
- для пушных зверей и морских свинок — в разведениях 1:10.1:20.1:40 и 1:80.
Исследование каждой сыворотки проводят в пяти пробирках.
7.4.3.3 Получение исходного разведения проб сыворотки:
- сыворотки крови крупного рогатого скота (лошадей, верблюдов) по 0.1 см3 вносят в пробирки
первого ряда, содержащие по 2.4 см3фенолизированного 0.85 %-ного раствора хлористого натрия по
7.4.2 (разведение 1.25);
- сыворотки крови овец, коз и собак по0,2 см3вносят в пробирки первого ряда, содержащие по 2,3см3
фенолизированного 5 %-ного раствора хлористого натрия по 7.4.2 (разведение 1:12.5);
- сыворотку крови оленей и маралов по 0.2 см3 вносят в пробирки первого ряда, содержащие по
2,3 см3фенолизированного 10 %-ного раствора хлористого натрия по 7.4.2 (разведение 1:12,5):
- сыворотку крови пушных зверей и морских свинок по 0.3 см3вносят в пробирки первого ряда, со
держащие по \2 см3 фенолизированного 0,85 %-ного раствора хлористого натрия по 7.4.2(разведение 1:5);
- при исследовании с Я?-бруцеллезным антигеном (B.canis) сыворотку крови собак по 0.1 см3 вно
сят в пробирки, содержащие по 2.4 см3фенолизированного 0.85 %-ного раствора хлористого натрия по
7.4.2 (разведение 1.25).
В пробирки второго ряда раствор хлористого натрия не вносят.
В пробирки третьего, четвертого и пятого рядов вносят по 0.5 см3соответствующего фенолизиро
ванного раствора хлористого натрия по 7.4.2.
Затем в пробирки второго и третьего рядов вносят по 0.5 см3исходного разведения сыворотки.
После пилотирования (не менее трех раз) разведение сыворотки из третьего ряда по0.5 см3 пере
носят в пробирки четвертого ряда и после пилотирования из четвертого — в пятый. Из пробирок пятого
ряда 0.5 см3 жидкости удаляют. Таким образом, получают последовательные двукратные разведения
образцов сыворотки.
7.4.3.4 В пробирки второго, третьего, четвертого и пятого рядов с разведенными сыворотками вно
сят при помощи группового дозатора Флоринского или другого дозирующего устройства по 0.5 см3анти
гена в рабочем разведении 1:10 (1,0 + 9.0 см3) соответствующим фенолиэированным раствором хлори
стого натрия по 7.4.2.
После внесения антигена разведение сыворотки в кахщой пробирке удваивается.
8