ГОСТ 34105—2017
Консервированная кровь при хранении в холодильнике пригодна для использования, как правило, в
течение 10—14 сут.
Гемолитическую систему готовят перед каждой постановкой РСК. Для этого 2,5 %-ную взвесь от
мытых эритроцитов и раствор гемолитической сыворотки в рабочем разведении смешивают в равных
объемах и при постановке РСК выдерживают в водяной бане при 37 вС—38 °С в точение 15—35 мин (в
зависимости от объема и толщины стенок сосуда) при периодическом перемешивании, а при по
становке РДСК — в холодильнике. При смешивании компонентов раствор гемолитической сыворотки
вносят во взвесь эритроцитов.
Исследуемые и контрольные (бруцеллезная и негативная) сыворотки крови крупного рогатого скота
в исходном разведении 1:5 инактивируют в день постановки реакции в водяной бане: для РСК — при
60 °С—62 “С в течение 30 мин (сыворотки крови ослов и мулов — 64 °С—65 °С. буйволов — 62 °С—64
°С, свиней — 58 °С—60 аС); для РДСК — сыворотки крови животных всех видов — при 63 °С—64 5С в
тече ние 30 мин.
Рабочие разведения всех компонентов для РСК (РДСК) готовят перед постановкой реакции и про
веряют их на антикомпломентарные и гемотоксические свойства по следующей схеме, представленной в
таблице 1.
Таблица 1— Проверка ангиксмплементарных и гемотоксических свойств компонентов реакций
Наименование и объем
компонентов реакции, см3
Антикомпле
ыемтармость
Гемотоксичностъ
комплемента
гемолитической
сыворотки
антигена
0.8S %-иыи
раствор хлористого
натрия
Комплемент в разведении 1:20
0.2
0,2
—
—
—
Гемолитическая сыворотка в ра
бочем разведении
0.2
_
0.2
_
Антиген в рабочем разведении
0.4
—
—
_
0.4
—
Эритроциты.
2.5 %-ная взвесь
0,2
0.2
0.2
0.2
0.2
0.85 %-ный раствор хлористого
натрия
_
0.6
0.6
0.4
0.8
Водяная баня 10 мин при 37 "С—38 ’С
РезультатГемолизПолная задержка гемолиза эритроцитов
В реакциях используют компоненты, не обладающие антикомплементарными и гемотоксическими
свойствами.
7.5.4 Проведение исследования в РСК
При массовом исследовании постановку реакции проводят в одной пробирке в разведении сы
воротки 1.5 с антигеном, при постановке в трех пробирках исследуемые сыворотки исследуют в раз
ведениях 1:5 и 1:10 с антигеном и 1:5 без антигена (контроль на антикомплементарность сывороток),
(таблица 2).
Необходимые разведения сывороток готовят следующим образом:
- при массовом исследовании в одной пробирке к 0.05 см3 исследуемой сыворотки добавляют
0.2 см30.85 %-ного раствора хлористого натрия (разведение 1:5):
- при постановке реакции в трех пробирках в первую вносят 0.1 см3исследуемой сыворотки, до
бавляют 0,4 см30.85 %-ного раствора хлористого натрия (разведение сыворотки крови 1:5 в объеме 0.5
см3) и смешивают. Из первой пробирки переносят 0.2 см3во вторую пробирку и 0.1 см3— в третью. В
третью пробирку добавляют 0.1 см30.85 %-ного раствора хлористого натрия (разведение 1:10).
Инактивирование разведенных сывороток проводят в порядке, указанном в 7.5.3.3.
Сыворотку. 0,85%-ный раствор хлористого натрия и другие компоненты реакции вносят при по
мощи индивидуальных пипеток, (дозаторов), групповыхдозаторов Флоринского или одноканальных пи-
петочных дозаторов с наконечником.
Постановку реакции проводят по схеме, представленной в таблице 2.
11