ГОСТ 33463.6—2016
Д.9.5 Приготовление растворов для разведений
Д.9.5.1 Приготовление солевого (физиологического) раствора
8.5 г хлорида натрия растворяют в 1000 см3 дистиллированной воды. Устанавливают pH раствора, равное
(7.0
±
0.1). Раствор разливают в термостойкие емкости и стерилизуют при температуре (120
±
2) ‘С в течение
15 мин. После стерилизации при необходимости корректируют pH раствора: значение pH раствора должно быть
(7.0
±
0.1).
Срок хранения раствора при температуре (23
±
2) *С — не более 1мес.
Д.9.5.2 Приготовление пептонного раствора
1г пептона растворяют при кипячении а 1000 см3дистиллированной воды. Устанавливают pH раствора. Зна
чение pH должно бытьравно (7.0
±
0.1). Раствор стерилизуют при температуре (120
±
2) ‘С в течение 20 мин. После
стерилизации при необходимости корректируют pH раствора: значение pH раствора должно быть (7.0 г 0.1).
Срок хранения раствора при температуре (23
±
2) ‘С— не более 1мес.
Д.9.5.3 Приготовление пептонно-солевого раствора
8.5 гхлорида натрия и 1г пептона растворяют при кипячении в 1000 см3дистиллированной воды. Устанавли-
вают pH раствора. Значение pH должнобытьравно (7.0 * 0.1). Стерилизуют при температуре (120 г 2) ‘Свтечение
20 мин. После стерилизации при необходимости корректируют pH раствора: значение pH раствора должно
быть (7.0 х 0.1).
Срок хранения раствора при температуре (23 х 2) “С — не бопее 1мес.
Д.10 Минеральная среда Бонде
Компоненты среды приведены в таблице Д.2.
Т а б л и ц а Д.2
КомпонентыМасса (объем)
Натрий лимоннокислый трехэамещенный. г28
Натрий аммоний фосфорнокислый, г15
Калий фосфорнокислый однозамещенный. г10
Магний сернокислый (сульфат магния), г 2
Вода дистиллированная, см3 1000
Ингредиенты растворяют при нагревании, стерилизуют при 1 атм. 20 мин. Перед посевом добавляют 5 см3
0,01 %-ного водного раствора кристаллического фиолетового на 100 см3 среды.
Д.11 Среда Блеск
100 см3 питательного агара, стерильного, приготовленного из сухого препарата по рецептуре на этикетке,
расплавляют на водяной бане. После охлаждения до температуры (45—50) ‘С добавляют 0.3г L-аргинина.
8 см310 %-ного водного раствора трифенилтетразолий хлорида (ТТХ). 10 см3стерильного обезжиренного теплого
молока, тщательно перемешивают и разливают в чашки слоем не менее 25 см3.
Д.12 Магниевая среда накопления в экспедиционной модификации
Предварительно готовят навески всех ингредиентов среды в расфасованном виде, которые затем вносят в
исследуемую воду в соответствии с рецептурой, указанной в таблице Д.З:
Т а б л и ц а Д.З
Компоненты среды
Масса (объем) компонентов
при объеме исследуемой пробы воды:
500 см3100 см1
Магний хлористый кристаллический, г19.53.9
Натрий хлористый, г4.00.8
Калий фосфорно-кислый однозамещенный безводный, г0.80.16
10 %-ный раствор пептона, см3 25.0 5.0
Дрожжевой экстракт, см3 11.0 2.5
Бриллиантовый зеленый 0,1 %-ный водный раствор, см32.5 0.5
28