ГОСТ 33463.6—2016
Инкубацию посевов проводят при температуре (36
i
2) °С.
Хромогеммые средыобеспечиваютодновременное определениеколиформныхбактерий иЕ.coli в
одномпосеве. Длядифференциации колиформныхбактерий иЕ.coliиспользованы различияуказанных
видовбактерийпоферментативной активности. Колиформные бактерии имеютфермент[Угалактозида-
зу. а Е. coli — помимоэтого фермента обладаютферментом |^глюкуронидазой.
В качестве колиформных бактерий учитывают красные и красно-коричневые с окрашенным орео
лом вокруг колонии. Вкачестве Е.coli учитывают колонии бактерий сине-фиолетового цвета.
На среде хромокульт колиформ агаре иные бактерии, за исключением бактерий Е. coli. обладаю
щих ферментом p-глюкуронидазой. образуют колонии светло-голубого цвета, которые при подсчете не
учитывают.
Обработку иоформление результатов проводят по ГОСТ31955 (раздел 9.10).
П р и м е ч а н и е — Метод с использованием хромокульт колиформ агара имеет такую же воспроизводи
мость результатов как при посеве на среды Эндо и тергитол-7 с ТТХ.
8.4 Определение энтерококков
8.4.1 Определенно энтерококков методом мембранной фильтрации
8.4.1.1 Фильтруют 100 см3 пробы воды через мембранные фильтры с соблюдением требований,
представленныхв приложении Е. Послефильтрованияфильтры переносят, непереворачивая, на плот
ную агаризованную среду энтерококкагара (см. Д.9.1 приложения Д) или агаризованную плотную азид
ную среду Сланеца-Бертли (см. Д.9.2 приложенияД) идобиваются полного прилегания его к среде без
образования пузырьковвоздуха. Чашки Петри спосевами помещаютв термостатдном вверх иинкубиру
ют при температуре (36
±
2) °С в течение 24—48 ч.
При отсутствии роста колоний инкубацию посевов продолжаютдо 48 ч.
После инкубации посевов учитывают колонии, характерные для энтерококков — выпуклые, с ров
ными краями, темно-малиновые, розовые, светло-розовые, равномерно окрашенные или стемно-крас
ным не четко оформленным центром и подсчитывают ихчисло.
Оченьмелкие(на пределевидимости невооруженнымглазом), плоские разных оттенков, ярко-мали
новые с четко выраженным малиновым центром ибесцветным ободком колонии неучитывают.
Регистрируют число колоний энтерококков или их отсутствие вжурнале испытаний.
8.4.1.2 При необходимости подтверждают наличие энтерококков с помощью тест-систем для
идентификации энтерококков (в соответствии с инструкцией производителя) или одним из следующих
способов.
Пересеваютпо 2—3 колонии каждого типа:
- секторами на солевой агар с ТТХ (см. Д.9.3 приложения Д) и инкубируют при температуре
(36 * 2) “Св течение 24 ч. Энтерококки на указанной средедают равномерный нежный рост на протяже
нии всего штриха. Иные бактерии на этой подтверждающей среде не растут или растут на платформе
штриха:
- мембранныйфильтрсвыросшимиколониями стерильнымпинцетом, непереворачивая, перено
сят на поверхность желчь-эскулин-азидного агара, предварительно нагретого до 44 °С, и помещают в
термостатна(44.0 * 0.5) °С(см. Д.9.4 приложенияД). инкубируютв течение2 ч. В течениеэтого времени
эскулингидролизируетсяэнтерококкамисобразованием характерных продуктов, чтопроявляетсяокра
шиванием типичныхдля кишечныхэнтерококков колонийот коричневого до черного цвета.
8.4.1.3 Подсчитываютчисло колоний энтерококков на фильтрах, где выросло менее 50—70 коло
ний. суммируюти определяют поформуле
Х =
а
V
100
(
2
)
где X — число КОЕ энтерококков в 100 см3исследуемой воды;
а — число подсчитанныхэнтерококков в сумме;
V— объем воды, профильтрованныйчерез фильтры, на которых велся учет.
В протоколе исследования выдают «Число КОЕ энтерококков в 100 см3 анализируемой пробы
воды».
Приотсутствиив пробеанализируемойводы энтерококков впротокол испытанийвносяттекст: «Не
обнаруженоКОЕ энтерококковв 100 см3пробы анализируемой воды».
ю