ГОСТ 33463.6—2016
грамотрицательныхбактерийилишьнемногиеТТХ-резистеитныеэнтеробактериимогутразвиватьсяна
среде «Блеск» в виде темно-красных разного размера колоний, лишенных блеска, или выпуклых
блестящих ярко-красных колоний.
При наличии множественного роста колоний с золотистым блеском достаточно отобрать для
последующего исследования 1—2 изолированные наиболее типичные колонии. При росте единичных
колоний с блеском или с золотистыми вкраплениями следует отбирать все типичные колонии, но не
более 5—6.
П р и м е ч а н и е — В соответствии со стандартами ИСО допускается определение Р. aeruginosa методом
мембранной фильтрации с помещением фильтров с посевами на цетримидный агар.
8.6.3 Подтверждение обнаружения Р. aeruginosa
ДляподтвержденияобнаруженияР. aeruginosa наиболеетипичныеколонииотсеваютна питатель
ный агар иидентифицируют на тест-системе «неферм-тест».
По методу2 Р.aeruginosa недолжны содержаться в 1000 см3исследуемой воды.
8.7 Определение патогенных бактерий семейства Enterobacteriaceae
8.7.1 Метод 1. Посев проб воды для определения патогенных бактерий семейства
Enterobacteriaceae, в том числе сальмонелл
Для определения патогенных бактерий семейства Enterobacteriaceae исследуют 1000 см3 воды,
засевая по500см3 в две среды накопления: магниевую среду — для определения сальмонелл(см. Д. 12
приложения Д) и селенитовый бульон — для определения патогенных бактерий семейства
Enterobacteriaceae. в том числесальмонелл (см. Д.15. приложенияД) или другиеапробированные ираз
решенные к применению для этих целей среды накопления.
При посеве пробы воды в магниевую среду в стерильную емкость с навесками поД.12 (приложе
ниеД) прибавляют 500 см3исследуемой пробы воды, послечегодобавляютдрожжевойэкстракти брил
лиантовый зеленый.
При посеве пробы воды в селенитовый бульон для определения патогенных энтеробактерий к
500 см3исследуемой воды добавляют 500 см3селенитового бульона двойной концентрации (см. Д.15.
приложенияД).
8.7.2 Метод 2. Посев проб воды для определения сальмонелл методом мембранной
фильтрации
Для посева двух объемов по 500 см3 отбирают 1000 см3 воды. Каждый объем профильтровывают
через один или несколько мембранных фильтров. Затем эти фильтры помещают в любые две из пере
численных сред накопления объемом 50 и 100 см3. При затрудненной фильтрации большого объема
пробы следует на фильтр с диаметром пор 0.45 мкм наложить фильтр с большим диаметром пор для
задержания взвешенных частиц с последующим помещением в питательную среду накопления обоих
фильтров.
8.7.3 Проведение анализа
Посевы воды в средах накопления инкубируют при температуре (36
±
2) °С в течение промежутка
времениот 18до 20ч. При отсутствии роста втечение24 чпробы инкубируют48 ч. При обнаружении рос та
(помутнения среды) производят высев бактериологической петлей на две чашки с висмут-сульфит-ным
агаром (см. Д.14 приложения Д) идве чашки Эндо (см. Д.4 приложенияД).
Рассевпроизводятодним изметодовполучения изолированныхколоний. Чашки Петри спосевами
инкубируют при температуре (36
i
2) “Св течение промежутка времени от 18 до 24 ч.
На висмут-сульфитном агаре колонии сальмонелл круглые, черные, с металлическим блеском, с
сероватым металлическим ободком вокругколоний, так называемое «зеркало», зеленые с темным цен
тром и без него, вызывающие потемнение среды под колониейдо черного цвета.
Выросшие на среде Эндо небольшие колонии бледно-розовые, прозрачныес ровными или неров
ными краями идентифицируют на принадлежность к патогенным энтеробактериям. В отличие от пато
генных бактерий. E.coli и колиформные бактерии образуют круглые, выпуклые, гладкие, малинового
цвета колонии с металлическим блеском ибез него.
При обнаружении подозрительных на сальмонеллы (Shigella или др.) колонии отсевают по 4—5
каждого вида в пробирки с комбинированными средами для определения биохимических свойств, под
тверждающих принадлежность к родам Salmonella (Shigella или др.) типа Клиглера или Олькеницкого.
Окончательноеопределение биохимическихсвойств проводят потест-системам, серологических
свойств сероваров — по инструкциям производителя сывороток, разрешенных к применению в соотве
тствиис 8.1.6.
14