ГОСТ Р ИСО 29701—2015
Н А Ц И О Н А Л Ь Н Ы ЙС Т А Н Д А Р ТР О С С И Й С К О ЙФ Е Д Е Р А Ц И И
НАНОТЕХНОЛОГИИ
Наноматериалы для испытаний в тест-системах /л
vitro.
Метод определения содержания эндотоксинов с использованием лизата амебоцитов
Limulus
(ЛАЛ-тест)
Nanotechnologies. Nanomaterials for testing in assay systems
in vitro.
Method for determination of endotoxin using
Limulus
amebocyte lysate (LAL-test)
Дата введения — 2016—07—01
1 Область применения
Настоящий стандарт распространяется на наноматериалы для испытаний в тест-системах
in vitro
и устанавливает метод определения содержания (количественной концентрации) эндотоксинов с ис
пользованием лизата амебоцитов (ЛАЛ-тест). ЛАЛ-тест применим для водных суспензий или экстрак
тов наноматориалов. пригодных для инкубирования при температуре 37 °С.
2 Термины и определения
В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определениями:
2.1 коагулоген (coagulogen): Способный свертываться белок, в результате реакции которого с
эндотоксинами при проведении ЛАЛ-теста происходит увеличение вязкости испытуемого раствора и
образование плотного геля.
П р и м е ч а н и е — Коагулоген получают из клеток крови японского мечехвоста
(Tachypleus tndentatus).
Коа
гулоген состоит из 175 аминокислот. Молекулярная масса коагупогена — 19723 [7].
2.2 коагулин (coagulin): Фрагмент коагулогена. образующийся в результате протеолиза коагуло-
гена и свертывающегося фермента при проведении ЛАЛ-теста.
П р и м е ч а н и е — Коагулин получают из клеток крови японского мечехвоста
(Tachypleus tridantatus).
Коа
гулин состоит из N-концевых фрагментов пептидов (Ala 1 — Arg 18) и С-концевых фрагментов пептидов (Gly47 —
Phe175)(71.
2.3 эндотоксин (endotoxin). Компонент наружной части клеточной мембраны грамотрицательных
бактерий.
П р и м е ч а н и е — Основным активным компонентом эндотоксинов являются липополисахариды (ЛПС).
2.4 единица эндотоксина: ЕЭ (endotoxin unit; EU): Стандартная единица активности эндотоксинов.
П р и м е ч а н и я
1 Комитетом экспертов по стандартизации биологических препаратов (КЭСБП) Всемирной организации
здравоохранения (ВОЗ) в 1996 году установлено значение ЕА. соответствующее 0.1 нг или 10 ЕЭ/нг эндотоксинов
кишечной палочки
(Escherichia coli)
Американского национального стандарта эндотоксина (АНСЭ) [8].
2 Одна ЕЭ соответствует одной международной единице (ME) эндотоксина.
2.5 чувствительность ЛАЛ-реактива /. (lambda.
).):
Значение концентрации эндотоксинов, заяв
ленное изготовителем и используемое при вычислениях в гель-тромб тесте, при построении стандарт
ной кривой в турбидиметрических и хромогенных методах, выраженное в ЕЭ/мл.
Издание официальное
1