ГОСТРИСО 29701—2015
Приложение D
(справочное)
Кинетически© методы
D.1 Общие сведения
В настоящем приложении приведено описание кинетических методов (турбидиметрического кинетического
метода и хромогенного кинетического метода) с использованием спектрофотометра или микропланшетного фото
метра с термостатом для инкубирования1>.
D.2 Реактивы
D.2.1 Лиофилизированный ЛАЛ-рвактив с заявленной чувствительностью А, для турбидиметрического кине
тического метода или хромогенного кинетического метода.
D.22
Буферный раствор для ЛАЛ-реактива.
D.2.3 Вода для ЛАЛ-теста НСЭ.
D.2.4 Лиофилизированный КСЭ.
П р и м е ч а н и е — Все реактивы можно приобрести в наборах для проведения ЛАЛ-теста. имеющихся в
продаже.
D.3 Оборудование
D.3.1 Стеклянные пробирки НСЭ или микропланшеты НСЭ из полистирола.
П р и
и
еч а н и я
1 Подготовку посуды, оборудования и материалов, применяемых в кинетических методах, проводят в соот
ветствии с 6.5.2.
2 Оборудование, материалы, контейнеры и флаконы с веществами НСЭ. применяемые в кинетических ме
тодах. маркируют как апирогенные.
D.3.2 Стеклянные пробирки НСЭ или пробирки и контейнеры НСЭ из полистирола для приготовления ис
пытуемых растворов.
П р и
и
еч а н и я
1 Подготовку посуды, оборудования и материалов, применяемых в кинетических методах, проводят в соот
ветствии с 6.5.2.
2 Оборудование, материалы, контейнеры и флаконы с веществами НСЭ. применяемые в кинетических ме
тодах. маркируют как апирогенные.
D.3.3 Пилетки. автоматические пипетки, наконечники пипеток, шприцы однократного или многократного при
менения НСЭ.
D.3.4 Спектрофотометр или микропланшетный фотометр с термостатом для инкубирования.
D.4 Приготовление испытуемых растворов для построения стандартной кривой
D.4.1 Приготовление базового раствора эндотоксинов
Для приготовления базового раствора эндотоксинов применяют лиофилизированный КСЭ. Содержимое
флакона с КСЭ разбавляют водой НСЭ. Разведение и хранение КСЭ осуществляют в соответствии с инструкцией
изготовителя.
D.4.2 Приготовление стандартных растворов эндотоксинов
Стандартные растворы эндотоксинов получают путем разведения базового раствора эндотоксинов водой
НСЭ. Следует приготовить не менее трех стандартных растворов эндотоксинов, содержащих КСЭ различной кон
центрации. включая раствор с содержанием КСЭ концентрацией, соответствующей заявленной чувствительности
ЛАЛ-реактива. С целью минимизации ошибок при аликвотировании следует учитывать, что получаемые
стандарт ные растворы (при любом факторе разведения базового раствора) должны содержать КСЭ.
разбавленный водой не более чем в 10 раз.
D.5 Приготовление растворов для контроля И/А
Растворы для контроля И/A готовят путем смешивания КСЭ с неразведвнной испытуемой пробой. Для испы
таний готовят серию растворов для контроля И/A. содержащих КСЭ различной концентрации (например, конечная
концентрация КСЭ в испытуемом растворе должна быть 2X, 4А или соответствовать среднему значению концен-
11Измерительные системы, с помощью которых одновременно проводят инкубирование испытуемых рас
творов при заданной температуре, выполняют измерения ОП через заданные интервалы времени и обработку
результатов испытаний.
14