ГОСТР ИСО 29701— 2015
Приложение В
(справочное)
Гель-тромб тест
В.1 Общие сведения
В настоящем приложении приведено описание гель-тромб теста с применением ЛАЛ-реактива.
В.2 Реактивы
В.2.1 ЛАЛ-реактив с заявленной чувствительностью А. предназначенный для гель-тромб теста.
В.2.2 Вода для ЛАЛ-теста НСЭ.
В.2.3 Лиофипизированный КСЭ1*.
П р и м е ч а н и е — Допускается использовать л ио филизированные ЛАЛ-реактивы. приготовленные само
стоятельно в соответствии с инструкцией изготовителя или приобретенные и готовые к применению.
В.З Оборудование
В.3.1 Стеклянные пробирки НСЭ, посуда НСЭ, контейнеры из полистирола НСЭ для приготовления испыту
емых растворов.
П р и м е ч а н и я
1 Подготовку посуды, оборудования и материалов, применяемых в гель-тромб тесте, проводят в соответ
ствии с 6.5.2.
2 Оборудование, материалы, контейнеры и флаконы с веществами НСЭ. применяемые в гель-тромб тесте,
маркируют как апирогенные.
В.3.2 Штативы для пробирок.
В.3.3 Пипетки, автоматические пипетки, наконечники пипеток, шприцы однократного или многократного при
менения НСЭ.
В.3.4 Водяная баня с непроточной водой или термостат для инкубирования, обеспечивающие поддержание
температуры (37±1) ”С.
В.3.5 Вихревой миксер.
В.3.6 Хронометр или другое средство для измерения времени.
В.4 Приготовление испытуемых растворов
В.4.1 Приготовление базового раствора эндотоксинов
Для приготовления базового раствора эндотоксинов применяют лиофипизированный КСЭ. Содержимое
флакона с КСЭ разбавляют водой для ЛАЛ-теста НСЭ. Разведение и хранение КСЭ осуществляют в соответствии с
инструкцией изготовителя.
В.4.2 Приготовление стандартных растворов эндотоксинов
Стандартные растворы эндотоксинов получают путем разведения базового раствора эндотоксинов водой
для ЛАЛ-теста НСЭ. Стандартные растворы эндотоксинов должны содержать КСЭ концентрацией 0,25л, 0.5А, 1/.
и 2/.. С целью минимизации ошибок при аликвотировании следует учитывать, что получаемые стандартные рас
творы (при любом факторе разведения базового раствора) должны содержать КСЭ. разбавленный водой не более
чем в 10 раз.
В.5 Приготовление растворов для контроля И/А
Растворы для контроля И/A готовят путем смешивания КСЭ с неразведанной испытуемой пробой. Растворы
для контроля И/А должны содержать КСЭ концентрацией 0,25/.. 0.5л. 1л и 2л. В растворе для контроля И/A содер
жание КСЭ не должно превышать 5 % общего объема раствора, то есть при общем объеме раствора для контроля
И/А 1.0 мл содержание КСЭ не должно превышать 50 мкл.
В.6 Приготовление испытуемой пробы
Испытуемую пробу готовят путем разведения пробы наноматериала с водой для ЛАЛ-теста НСЭ. Для испы
таний готовят серию растворов с фактором разведения 2. 4. 8 или бопее (при необходимости).
1>Активность КСЭ установлена по Международному стандарту эндотоксина ВОЗ, который соответствует
АНСЭ, установленному Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и лекарственных
средств США.
9