ГОСТРИСО 29701—2015
В.7 Проведение испытаний
В.7.1 Подтверждение заявленной чувствительности ЛАЛ-реактива
В.7.1.1 Воду для ЛАЛ-теста НСЭ (отрицательный контроль), стандартные растворы эндотоксинов (водные
растворы, содержащие КСЭ концентрацией 0.25/.. 0.5л. 1А или 2/.) добавляют в пробирки с ЛАЛ-реактивом и пере
мешивают. Число повторностей для всех испытуемых растворов — четыре.
В.7.1.2 Пробирки с испытуемыми растворами инкубируют при температуре (37 ± 1) "С в течение (60 ± 2) мин.
Во время инкубирования следует избегать вибрации и ударов.
В.7.1.3 По истечении указанного срока каждую пробирку проверяют визуально и регистрируют результаты
как положительные, так и отрицательные. Результат считают положительным, если произошло образование плот
ного геля, который не разрушается при аккуратном однократном переворачивании пробирки на 180’.
Результат считают отрицательным, если образование плотного геля не произошло или образован неплотный гель.
В.7.1.4 Результаты испытаний считают достоверными, если получены отрицательные результаты во всех по
вторностяхдля отрицательного контроля и стандартного раствора эндотоксинов, содержащего КСЭ концентрацией
0.25 А.
В.7.1.5 Конечной точкой реакции для каждой из повторностей стандартных растворов эндотоксинов являет
ся положительный результат, полученныйдля раствора с наименьшей концентрацией КСЭ. Среднегеометрическое
значение чувствительности ЛАЛ-реактива. с. в конечной точке реакции вычисляют по формуле
с = antilog
I— )(В.1)
где с — среднегеометрическое значение чувствительности ЛАЛ-реактива;
1в
— сумма логарифмов концентраций КСЭ в конечной точке реакции в каждой из повторностей;
f
— число повторностей.
В.7.1.6 Заявленную чувствительность ЛАЛ-реактива считают подтвержденной и используют в дальнейших
вычислениях в том случае, если полученное среднегеометрическое значение чувствительности ЛАЛ-реактива на
ходится в пределах от 0.5 до 2/..
П р и м е ч а н и е — Рекомендуется проверять заявленную чувствительность ЛАЛ-реактива в каждой новой
партии
В.7.2 Подтверждение достоверности результатов испытаний
В.7.2.1 Воду для ЛАЛ-теста НСЭ (отрицательный контроль), стандартные растворы эндотоксинов (водные
растворы, содержащие КСЭ концентрацией 0,25/.. 0.5/.. 1
а
или 2/.), растворы для контроля И/A с содержанием КСЭ
концентрацией 0.25А. 0.5/., 1>. и 2/. и испытуемую пробу добавляют в пробирки с ЛАЛ-реактивом и перемешивают.
Число повторностей для отрицательного контроля и стандартных растворов эндотоксинов — две, растворов для
контроля И/A и испытуемой пробы — четыре.
В.7.2.2 Испытания проводят в соответствии с В.7.1.2 и В.7.1.3.
В.7.2.3 Результаты испытаний считают достоверными, если получены отрицательные результаты во всех по
вторностях для отрицательного контроля и испытуемой пробы, среднегеометрическое значение чувствительности
ЛАЛ-реактива находится в пределах от 0.5 до 2А. подтвержденное результатами испытаний стандартных растворов
эндотоксинов.
П р и м е ч а н и е — При наличии эндотоксинов в испытуемой пробе ее разбавляют до получения раствора с
содержанием эндотоксинов ниже уровня, определяемого ЛАЛ-тестом.
В.7.2.4 Среднегеометрическое значение концентрации эндотоксинов в конечной точке реакции в растворах
для контроля И/А вычисляют по формуле (В.1). приведенной в В.7.1.5. Полученное среднегеометрическое значе
ние должно находиться в пределах от 0.5 до 2л.
В.7.2.5 В случае если среднегеометрическое значение концентрации эндотоксинов в конечной точке реак
ции в растворах для контроля И/A выходит за пределы вышеуказанного диапазона, то испытания проводят по
вторно. выполнив дополнительное разведение испытуемой пробы. Заявленную чувствительность ЛАЛ-реактива
корректируют путем разбавления испытуемой пробы, устраняя, таким образом, факторы, мешающие проведению
ЛАЛ-теста.
В.7.2.6 Мешающие факторы могут быть устранены при соответствующей обработке испытуемой пробы, на
пример при фильтрации, нейтрализации, диализе или температурной обработке.
В.7.2.7 Если мешающие факторы нельзя устранить путем разведения или обработки испытуемой пробы, то
испытание наноматериала по определению концентрации эндотоксинов гель-тромб тестом не проводят.
В.7.3 Анализ испытуемой пробы
В.7.3.1 Воду для ЛАЛ-теста НСЭ (отрицательный контроль), растворы для контроля И/A (например, испы
туемая проба, содержащая КСЭ концентрацией 2).). стандартные растворы эндотоксинов (растворы, содержащие
КСЭ концентрацией 0.25А, 0.5/.. 1/. и 2
а
)
и
испытуемая проба (неразведенная испытуемая проба и растворы испы-
10