ГОСТР ИСО 29701— 2015
С.5 Приготовление растворов для контроля И/А
Растворы для контроля И/A готовят путем смешивания КСЭ с неразведанной испытуемой пробой. Для испы
таний готовят серию растворов для контроля И/A. содержащих КСЭ различной концентрации (например, конечная
концентрация КСЭ в испытуемом растворе должна быть 2
а
,
At.
или соответствовать среднему значению концен
траций КСЭ. использованных для построения стандартной кривой). В растворе для контроля И/A содержание КСЭ не
должно превышать 5 % общего объема раствора, то есть при общем объеме раствора для контроля И/А 1.0 мл
содержание КСЭ не должно превышать 50 мкп.
С.6 Проведение испытаний
С.6.1 Для приготовления испытуемых растворов лиофилизированный ЛАЛ-реактив, содержащий хро-
могенный субстрат, разводят в воде для ЛАЛ-теста НСЭ или буферном растворе в соответствии с инструкцией
изготовителя.
С.6.2 Воду для ЛАЛ-теста НСЭ (отрицательный контроль), стандартные растворы эндотоксинов, растворы
для контроля И/А и испытуемую пробу смешивают с ЛАЛ-реактивом в соответствии с инструкцией изготовителя в
пробирках или микропланшете.
С.6.3 Пробирки или микропланшет с испытуемыми растворами инкубируют при температуре (37±1) "С в
течение времени, указанного в инструкции.
С.6.4 В испытуемые растворы добавляют раствор, замедляющий или останавливающий реакцию, в обьеме.
указанном изготовителем ЛАЛ-реактива. ОП испытуемых растворов измеряют спектрофотометром или микроппан-
шетным фотометром при длине волны 405 нм.
С.6.5 В случав применения измерительной системы, позволяющей одновременно инкубировать испытуе
мые растворы, измерять ОП и выполнять обработку результатов, испытания проводят в соответствии с инструкци
ей к измерительной системе.
С.7 Критерии приемлемости результатов испытаний
С.7.1 При построении стандартной кривой должна быть отражена зависимость значений ОП от значений,
полученных при испытании стандартных растворов эндотоксинов.
С.7.2 Результаты отрицательного контроля не должны превышать значений, соответствующих точке с мини
мальным значением на стандартной кривой.
С.7.3 Стандартная кривая должна быть построена на основе алгоритма линейной регрессии.
С.7.4 Абсолютное значение коэффициента корреляции стандартной кривой должно быть выше или равно
0,980. В случае если абсолютное значение коэффициента корреляции стандартной кривой не соответствует дан
ному значению, то испытания проводят повторно.
С.7.5 Погрешность результатов испытаний не должна превышать 25 %.
С.8 Обработка результатов испытаний
С.8.1 Результаты испытаний должны удовлетворять всем критериям, указанным в С.7.
С.8.2 Для каждой из повторностей определяют среднее арифметическое значение ОП на стандартной
кривой.
С.8.3 Вычисляют значение концентрации эндотоксинов для каждой из повторностей путем умножения зна
чения концентрации эндотоксинов, полученное при испытании, на соответствующее значение фактора разведе
ния. Далее вычисляют среднее арифметическое значение концентрации эндотоксинов.
С.8.4 Полученное среднее арифметическое значение является значением концентрации эндотоксинов в не
разведанной испытуемой пробе.
С.9 Подтверждение достоверности результатов испытаний
С.9.1 Содержание эндотоксинов в растворе для контроля И/А вычисляют путем деления значения концен
трации эндотоксинов в испытуемой пробе, в которую не добавлен КСЭ. на значение концентрации эндотоксинов в
испытуемой пробе после добавления КСЭ. Содержание эндотоксинов в испытуемых растворах выражают в про
центах. %.
С.9.2 Раствор для контроля И/А не содержит мешающих факторов, если при проведении испытаний зна
чение концентрации эндотоксинов, добавленных в испытуемый раствор, находится в пределах от 50 % до 200 %
значения концентрации эндотоксинов после вычитания значения концентрации эндотоксинов в растворе, в кото рый
не добавлен КСЭ. При наличии мешающих факторов значение концентрации эндотоксинов в растворе для
контроля И/А будет находиться вне пределов данного диапазона. Для устранения мешающих факторов осущест
вляют разбавление испытуемой пробы или подвергают ее фильтрации, нейтрализации, диализу или температур ной
обработке. Эффективность обработки испытуемой пробы контролируют посредством проведения повторного
испытания на наличие мешающих факторов. Раствор для контроля И/А следует готовить с использованием нано
материала. не являющегося мешающим фактором для проведения испытаний.
13