ГОСТР ИСО 29701— 2015
траций КСЭ. использованных для построения стандартной кривой). В растворе для контроля И/A содержание КСЭ не
должно превышать 5 % общего объема раствора, то есть при общем объеме раствора для контроля И/А 1.0 мл
содержание КСЭ не должно превышать 50 мкл.
D.6 Проведение испытаний
D.6.1 Для приготовления испытуемых растворов лиофилизированкый ЛАП-реактив разводят в воде для
ЛАЛ-теста НСЭ или буферном растворе в соответствии с инструкцией изготовителя.
D.6.2 Воду для ЛАЛ-теста НСЭ (отрицательный контроль), стандартные растворы эндотоксинов, растворы
для контроля И/A и испытуемую пробу смешивают с ЛАП-рвактивом в пробирках или микропланшете в соответ
ствии с инструкцией изготовителя.
D.6.3 Пробирки или микропланшет с испытуемыми растворами инкубируют при температуре (37±1) ®С в
течение времени, указанного в инструкции.
D.6.4 ОП испытуемых растворов измеряют спектрофотометром или микропланшетным фотометром при за
данной длине волны и через заданные интервалы времени.
D.6.5 Измеряют время, необходимое для достижения заданного (порогового) значения ОП испытуемых рас
творов (при значении ОП. равном 0.2. или значения ОП. указанного изготовителем). Время, необходимое для до
стижения заданного значения ОП. называют начальным временем реакции.
П р и м е ч а н и е — Измерительные системы, с помощью которых можно одновременно инкубировать ис
пытуемые растворы, измерять ОП и выполнять обработку результатов, коммерчески доступны.
D.7 Критерии приемлемости результатов испытаний
D.7.1 При построении стандартной кривой должна быть отражена зависимость значений начального време
ни реакции от значений, полученных при испытании стандартных растворов эндотоксинов. Для построения стан
дартной кривой используют значения концентрации эндотоксинов в стандартных растворах, преобразованные (на
пример. в форме десятичного логарифма) в соответствии с алгоритмом регрессии, рекомендуемым изготовителем
ЛАЛ-реактива.
D.7.2 Результаты отрицательного контроля не должны превышать значений, соответствующих точке с мини
мальным значением на стандартной кривой.
D.7.3 Абсолютное значение коэффициента корреляции стандартной кривой должно быть выше или равно
0.980. В случае если абсолютное значение коэффициента корреляции стандартной кривой не соответствует дан
ному значению, то испытания проводят повторно.
D.7.4 Погрешность результатов испытаний не должна превышать 25 %.
D.8 Обработка результатов испытаний
D.8.1 Результаты испытаний должны удовлетворять всем критериям, указанным 8 D.7.
D.8.2 Для каждой из повторностей определяют среднее арифметическое значение начального времени ре
акции на стандартной кривой.
D.8.3 Значение концентрации эндотоксинов для каждой из повторностей вычисляют путем умножения зна
чения концентрации эндотоксинов, полученное при испытании, на соответствующее значение фактора разведе
ния. Далее вычисляют среднее арифметическое значение концентрации эндотоксинов.
D.8.4 Полученное среднее арифметическое значение является значением концентрации эндотоксинов в не
разведанной испытуемой пробе.
D.9 Подтверждение достоверности результатов испытаний
D.9.1 Содержание эндотоксинов в растворе для контроля И/A вычисляют путем деления значения концен
трации эндотоксинов в испытуемой пробе, в которую не добавлен КСЭ. на значение концентрации эндотоксинов в
испытуемой пробе после добавления КСЭ. Содержание эндотоксинов в испытуемых растворах выражают в про
центах, %.
D.9.2 Раствор для контроля И/A не содержит мешающих факторов, если при проведении испытаний зна
чение концентрации эндотоксинов, добавленных в испытуемый раствор, находится в пределах от 50 % до 200 %
значения концентрации эндотоксинов после вычитания значения концентрации эндотоксинов в растворе, в кото рый
не добавлен КСЭ. При наличии мешающих факторов значение концентрации эндотоксинов в растворе для контроля
И/A будет находиться вне пределов данного диапазона. Для устранения мешающих факторов осущест вляют
разбавление испытуемой пробы или подвергают ее фильтрации, нейтрализации, диализу или температур ной
обработке. Эффективность обработки испытуемой пробы контролируют посредством проведения повторного
испытания на наличие мешающих факторов. Раствор для контроля И/A следует готовить с использованием нано
материала. не являющегося мешающим фактором для проведения испытаний.
15