ГОСТ 33163—2014
Пример - При посеве концентрированной соковой продукции высевают по 1 см3
исходного разведения в три пробирки с жидкой селективной средой
+
по 1 см3 первого
десятикратного исходного разведения в три пробирки с жидкой селективной средой
+ по
1см3второго десятикратного разведения в три пробирки с жидкой селективной средой.
При посеве готовой соковой продукции соответственно высевают соковую продукцию без
разведения и два последующих десятикратных разведения.
Посев соковой продукции или исходного разведения, или десятикратных разведений проводят
в среды в соотношении 1:10.
При посеве больших объемов исходных разведений или готовой продукции (например. 10 или
100 см3) допускается проводить посев соответственно в равные объемы сред двойной концентрации.
Посевы инкубируют при температуре (45 ± 1) °С по 8.1.5.
8.3.2 Выделение типичных колоний
Через (48 ± 2) ч посевы на бульоне обогащения достают из термостата и аккуратно
перемешивают содержимое пробирки или колбы с признаками любого роста.
После перемешивания питательную среду пересеивают методом истощающего штриха по
ГОСТ ISO 7218 на поверхность К-агара и на поверхность YSG-arapa или
ВАТ-
агара.
Засеянные чашки Петри и бульон обогащения без признаков роста помещают в термостат и
термостатируют при температуре (45 ± 1) ’С.
Если после двух суток культивирования по 8.1.5 в посевах на чашки Петри отсутствуют
признаки роста колоний, типичных для бактерий рода
Alicyclobacillus,
то общее время инкубации
чашек продлевают еще на (72 ♦ 2) ч. Из пробирок или колб, в которых появились признаки роста,
проводят пересевы петлей на поверхность плотных сред. Культивирование посевов проводят по
8.1.5.
По окончании культивирования посевов отбирают чашки Петри, на которых обнаружен рост
микроорганизмов.
8.3.3Подтверждениепринадлежностивыросшихколонийкбактериямрода
Alicyclobacillus
Подтверждение принадлежности выросших колоний проводят по разделу 9. Отбор колоний для
подтверждения их принадлежности к бактериям рода
Alicyclobacillus
проводят по 8.1.6.
8.3.4 Обработка результатов
Конечный результат выявления присутствия (отсутствия) бактерий рода
Alicyclobacillus
выражают в следующем виде: «В
X
г или
X
см3 соковой продукции обнаружены (не обнаружены)
бактерии рода
Alicyclobacillus
». где
X
- масса (объем) пробы соковой продукции, взятой на
исследование, г (см3).
При определении количества бактерий рода
Alicyclobacillus
по методу НВЧпосле
подтверждения принадлежности выросших на жидких средах бактерий к роду
Alicyclobacillus
пересчет их
количества на 1 г или 1 см3 соковой продукции проводят по ГОСТ 26670 или ГОСТ ISO 7218.
Обработка результатов - по 8.1.7.1 и 8.1.7.2.
9 Подтверждение принадлежности выделенных типичных колоний к бактериям рода
Alicyclobacillus
9.1 Для дальнейшего подтверждения выделенных культур изучают их отношение к окраске по
Граму. способности к росту при 3.7 ед. pH и способности к образованию гваякола (пероксидазный
тест. см. приложение Б).
9.2 Определение способности к росту при 3,7 ед. pH
9.2.1 Из каждой выбранной колонии засевают штрихами по ГОСТ ISO 7218 по одной чашке
Петри с нейтральной средой (например, мясопептонным агаром, триптическим соевым агаром).
К
агаром. ВАГ-агаром и две чашки с YSG-агаром.
9.2.2 Термостатируют посевы на нейтральной среде. К-агаре и ВАГ-arape и YSG-arapo при
температуре (45 ± 1) °С в течение 3-5 сут. Вторую чашку с посевом на среде YSG-arap
термостатируют при температуре (65 ± 1)°С в течение 2-3 сут.
9.2.3 На нейтральной среде рост бактерий рода
Alicyclobacillus
не наблюдается. Если в этой
среде отмечен рост колоний, то они не относятся к роду
Alicyclobacillus.
7