ГОСТ 33163—2014
8.1.4 Проведение посева
Подготовку чашек Петри со средой к посеву и посев проводят по ГОСТ ISO 7218.
Одновременно для контроля стерильности плотных питательных сред в контрольную
стерильную чашку Петри наливают около 15 см1среды и инкубируют вместе с посевами.
Содержимое каждой из двух колб, подготовленных по 8.1.2 или 8.1.3, фильтруют асептически с
применением мембранных фильтров и смывают остатки пробы с боковых частей установки для
фильтрования примерно 20 см3стерильной дистиллированной воды или физиологического раствора.
Первый мембранный фильтр асептически переносят на поверхность среды К-агар, а второй
фильтр переносят на поверхность ySG-arapa или
ВАТ-
агара, разлитых в чашки Петри, избегая
образования пузырьков воздуха между средой и фильтром. Поверхность фильтра с осевшими на ней
бактериями должна быть обращена вверх.
Посевы и контрольные чашки Петри со средой инкубируют вместе при одинаковых условиях.
8.1.5 Культивирование посевов
Переворачивают чашки Петри с посевами (см. 8.1.4) и с контролем плотных питательных сред
крышкой вниз, помещают в термостат и инкубируют при температуре (45 ± 1) СС в течение (48 ± 2) ч.
При термостатировании посевов проводят ежедневные наблюдения за появлением признаков
развития микроорганизмов.
Если после двух суток термостатирования в посевах нет признаков роста бактерий, то общее
время инкубации продлевают еще на (72 ± 2) ч.
П р и м е ч а н и е - Посевы следует защищать от высыхания во время инкубации, поместив их в
стерильный пластиковый пакет или иной герметичный контейнер.
8.1.6Подтверждениепринадлежностивыросшихколонийкбактериямрода
Alicyclobacillus
Подтверждение принадлежности выросших колоний проводят по разделу 9.
Для этого из посевов выбирают репрезентативное количество колоний (по пять колоний
каждого типа), с которыми будут выполнены последующие исследования, подтверждающие их
принадлежности к бактериям рода
AJicyclobacillus.
Если в посевах выросло менее пяти колоний, то для подтверждения принадлежности к
бактериям рода
Alicyclobacillus.
отбирают все выросшие колонии.
П р и ме ч а н и в - Среды
YSG
и
ВАТ
поддерживают рост всех известных видов бактерий рода
AlicydobacHlus.
Поэтому велика вероятность, что в данных средах будет виден более широкий спектр колоний по
сравнению с К-агаром.
8.1.7 Обработка результатов
8.1.7.1 При подсчете числа выросших колоний на К-агаре. ySG-arape или
ВА
7-агаре, по
окончании культивирования посевов по 8.1.5 отбирают чашки Петри с фильтрами и подсчитывают
выросшие колонии в том случае, если их число отвечает требованиям, указанным в 8.1.2. Если на
каждой из параллельных чашек Петри число колоний менее 10-15 КОЕ. то допускается использовать
для подсчета суммарное количество колоний, выросших на двух параллельных чашках, а также
допускается использовать чашки Петри, на которых выросло в сумме менее 15 колоний.
П р и м е ч а н и е - Если подсчитанное количество колоний менее 15. то результаты выражают, пользуясь
ГОСТ 26670 (справочное приложение) или по
ГОСТ ISO 7218.
Пример - Количество подсчитанных колоний равно А (менее 15), а в скобках
указывают нижнюю и верхнюю границу для 95 %-го доверительного интервала. Если на
чашках выросло более 15 отдельных колоний, то эти чашки также используют для
подсчета.
Пересчет количества бактерий рода
Alicyclobacillus
на 1 г (см3) в соковой продукции и запись
результатов проводят по ГОСТ 26670 или по ГОСТ ISO 7218.
Конечный результат подсчета количества бактерий рода
Alicyclobacillus
выражают в
«В 1 г или 1 см3 соковой продукции обнаружено число КОЕ бактерий рода
следующем виде:
Alicyclobacillus».
8.1.7.2 При
выявлении присутствия (отсутствия) бактерий рода
Alicyclobacillus
методом
мембранной фильтрации или методом прямого посева на плотные питательные среды подсчета
количества выросших колоний не проводят.
8.1.7.3 Результаты оценивают по каждой пробе отдельно и регистрируют в протоколе согласно
5