ГОСТ 33163— 2014
ГОСТ ИСО/МЭК 17025 с указанием метода и настоящего стандарта.
8.2 Метод прямого посева на поверхность питательной среды
8.2.1 Сущность метода
Метод основан на посеве определенного объема (массы) соковой продукции или ее разведений
на поверхность плотной селективной питательной среды, последующем инкубировании чашек с
посевами и подсчете числа типичных выросших колоний.
Метод прямого посева на питательные среды применяют для осветленных, неосветленных
концентрированных соков, осветленных соков, соков с мякотью или клетками цитрусовых фруктов и
концентрированных пюре при обсемененности не менее 1500 КОЕ в 1 г для концентрированной
соковой продукции и не менее 150 КОЕ в 1 см3для готовой соковой продукции.
В случаях, когда проводят выявление присутствия в соковой продукции бактерий рода
Alicyclobacillus
в виде спор или определяют их количество, проводят их дополнительную обработку
тепловым ударом по 8.1.3.
8.2.2 Приготовление исходной суспензии и последующих десятикратных разведений
Исходную суспензию продукта и последующие десятикратные разведения из нее готовят по (1].
Для приготовления исходного разведения 10 г концентрированной соковой
продукции,
отобранной по разделу 7, помещают в коническую колбу вместимостью 250 см3, разводят
физиологическим раствором в соотношении 1:10 и тщательно перемешивают.
Последующие десятикратные разведения соковой продукции готовят по [1] таким образом,
чтобы на поверхности чашки Петри вырастало от 15 до 150 типичных колоний.
П р и м е ч а н и е - Если на чашках выросло менее 15 отдельных колоний, то эти чашки также используют
для подсчета, при этом руководствуются примечанием к 8.1.7.1.
8.2.3 Посев на питательную среду
Проводят посев соковой продукции на две параллельные чашки Петри (если проба жидкая) или
из первичного исходного разведения другой соковой продукции и из каждого выбранного для посева
разведения. Переносят с помощью стерильной пипетки 0.1-0.2 см3 жидкой соковой продукции,
исходной суспензии (первичное разведение) или других разведений в середину каждой чашки Петри,
снабженной надписью и содержащей плотную среду.
Тщательно распределяют с помощью шпателя посевной материал равномерно и. по
возможности, быстро по поверхности среды, не касаясь стенок чашки Петри, пока на поверхности
агара не останется видимой жидкости.
8.2.4 Культивирование посевов
Культивирование посевов - по 8.1.5.
8.2.5Подтверждениепринадлежностивыросшихколонийкбактериямрода
Alicyclobacillus
Подтверждение принадлежности выросших колоний проводят по разделу 9. Отбор колоний для
подтверждения их принадлежности к бактериям рода
Alicyclobacillus
проводят по 8.1.6.
8.2.6 Обработка результатов - по 8.1.7.1 и 8.1.7.2.
8.3 Выявление присутствия (отсутствия) бактерий рода
Alicyclobacillus
и определение
количества по методу НВЧ
8.3.1 Сущность методов
Методы основаны на использовании предварительного обогащения для выявления присутствия
(отсутствия) бактерий рода
Alicyclobacillus
путем посева определенного объема или массы (для
концентрированной соковой продукции) в жидкие питательные среды.
Для концентрированной соковой продукции готовят исходное разведение, готовую соковую
продукциювысеваютбезразведений.Еслинеобходимо,тоиз исходногоразведения
концентрированной соковой продукции готовят ряд последовательных десятикратных разведений.
Необходимое количество соковой продукции высевают в жидкие селективные среды (см. приложение
Л).
При определении количества бактерий рода
Alicyclobacillus
в 1 г или в 1 см соковой продукции
по методу НВЧ высевают в трехкратной повторности не менее трех объемов или массы соковой
продукции, отличающиеся по количеству высеваемой соковой продукции в 10 раз.
6