ГОСТ 32542—2013
o
o
4.2 Протокол Концентрация * Время (C*t)
4.2.1 Общие положения
Пошаговое исследование Концентрация * Время (C*t) может быть рассмотрена как
альтернатива Традиционному протоколу при оценке ингаляционной токсичности. Такой подход
позволит подвергнуть животных воздействию нескольких уровней концентрации исследуемого
вещества и многочисленным периодам воздействия. Все испытания проводятся в камере,
предназначенной для воздействия через нос (камеры для воздействия через все тело не
используются в настоящем протоколе). Результатом исследований в соответствии с традиционным
протоколом и протоколом C*t являются значения CL
j
/LC
s
. но испытания по протоколу C*t
предпочтительней для получения значений CL01/LC0, и CL10/LC,0.
Исследование методом моделирования показало, что использование двух животных в
установленном интервале C*t (по одному каждого пола или два наиболее восприимчивого пола)
может быть целесообразным при испытании четырех или пяти концентраций в основном
исследовании. В некоторых случаях руководитель исследования может решить использовать по две
крысы каждого пола на интервал C*t. Использование двух животных каждого лола на каждый уровень
концентрации/момеит времени может уменьшить систематическую ошибку оценки и изменчивость,
увеличить коэффициент результативности и улучшить охват доверительного интервала. Тем не
менее, в случае неполного использования данных (при использовании по одному животному каждого
пола или двух наиболее восприимчивого пола) пятой экспозиции может быть достаточно.
4.2.2 Предварительное исследование
Также как и в Традиционном протоколе, предварительное исследование может предшествовать
основному исследованию или испытанию предельной концентрации для оценки эффективности
испытываемого вещества, определения гендерных различий в чувствительности и помощи в выборе
уровня концентрации для экспозиции в основном исследовании. При выборе уровня концентрации
для предварительного исследования нужно использовать всю имеющуюся информацию, включая
структурно-активные отношения и данные о близких по структуре веществах. Воздействию каждого
уровня концентрации должны быть подвержены не более трех самцов и трех самок (это количество
может понадобиться для того, чтобы установить различие в гендерной восприимчивости). Животных
нужно подвергнуть воздействию одной продолжительности, как правило, на 240 мин. Вместо
предварительного исследования допустимо использование результатов ранее выполненного
исследования.
4.2.3 Испытание начальной концентрации (Cxt протокол)
Начальная концентрация может быть предельной концентрацией или концентрацией,
выбранной руководителем исследований на основании предварительных исследований.
Группы 1 животное/пол подвергаются воздействию этой концентрации в течение различной
продолжительности времени (например. 15, 30, 60. 120 или 240 мин), всего общее количество
животных - 10 (Экспозиционная сессия I, пункт 4.2.5.2).
Выбор предельной концентрации, как правило, зависит от нормативных требований. При
использовании Классификационной системы СГС (GHS) предельная концентрация для газов, паров и
аэрозолей составляет 20.000 промилле. 20 мг/л и
разрешенная концентрация). Генерация предельных
5 мг/л соответственно (или максимально
концентраций для некоторых препаратов,
особенно для паров и аэрозолей, может быть технически затруднена. При испытании аэрозоля целью
является получение размеров частиц, пригодных для вдыхания (MMAD - от 1 до 4 pm) при
предельной концентрации 2 мг/л. Такое возможно для большинства исследуемых препаратов.
Тестирование аэрозоля воздействию предельной концентрации более 2 мг/л нужно осуществлять
только в случае, если величина частиц пригодна для вдыхания. СГС не одобряет испытаний на
излишне высокие предельные концентрации из соображений заботы о животных. Предельная
концентрация может быть превышена только по исключительно веской причине (охрана здоровья
человека), в таких случаях причина должна быть отражена в отчете. В случае, если тестируемый
препарат потенциально взрывоопасен, нужно избегать условий, благоприятных для взрыва. Чтобы
избежать ненужного использования животных, перед воздействием предельно разрешённой
концентрацией необходимо провести пробный тест, чтобы удостовериться, что в камере обеспечены
условия для проведения теста на предельно разрешенную концентрацию.
Если при испытании на предельно допустимую концентрацию наблюдаются смертность или
агония, результаты испытания могут заменить визуальное исследование при испытаниях других
концентраций. Если физические или химические свойства исследуемого препарата не позволяют
достичь уровня предельно допустимой концентрации, нужно исследовать максимально достижимую
концентрацию. Если при испытании максимально достижимой концентрации летальность составляет
более 50 %, дальнейшее исследование не требуется. Отчет по исследованию должен содержать
пояснения и данные, обосновывающие, почему невозможно достичь уровня предельно допустимой
7