ГОСТ 32647—2014
- Установление канцерогенных свойств химических веществ, проявляющихся в повышении
процента новообразований, в увеличении доли злокачественных новообразований или сокращение
времени появления новообразований, по сравнению с параллельными контрольными группами;
- определение времени появления новообразований;
- определение хронической токсичности химических веществ;
- определение органов-мишеней хронической токсичности и канцерогениости.
- описание зависимости доза-реакция;
- определение наименьшего уровня наблюдаемого вредного воздействия (NOAEL) или исходной
точки для установления минимальной дозы (BMD);
- экстраполяция канцерогенного влияния на человека при низких уровнях воздействия,
- прогнозирование воздействия хронической токсичности на уровне человеческого организма;
- предоставление данных для проверки гипотез относительно механизма действия [3. 8. 13. 14.
15.16].
2 Принцип исследования
Схема исследования состоит из двух параллельных фаз:хронической фазы и фазы
канцерогенмости (относительно продолжительностисм. пункты 34 и 35 соответственно).
Тестируемое вещество обычновводится перорально, хотя возможно также тестирование
ингаляторным или дермальным способом. Для хронической фазы тестируемое вещество вводят
ежедневно градуированными дозами нескольким группам тестируемыхживотных. один уровень дозы
на группу, как правило, в течение 12-ти месяцев, хотя может быть выбрана большая или меньшая
продолжительностьвзависимостиотнормативных требований(см.пункт34).Такая
продолжительность была выбрана потому, что она достаточна для любых проявлений кумулятивной
токсичности, не смешиваясь при этом с проявлениями возрастных изменений. План исследования
может также включать одно или несколько промежуточных умерщвлений, например, к 3 и 6 месяцам.
Для этого можно добавить дополнительные группы животных (см. п. 20). Во время канцерогенной
фазы исследуемоо вещество вводят ежедневно нескольким группам подопытных животных в течение
большей части их жизненного цикла. Животные в обеих фазах тщательно изучаются относительно
признаков токсичности и развития опухолевых поражений. Животным, которые умерли или были
умерщвлены в ходе тестирования, проводится аутопсия. По окончании исследования выживших
животных умерщвляют и также проводят аутопсию.
В оценке и анализе возможной канцерогениости и хронической токсичности химического
вещества, до началапроведения исследования, испытательной лабораторией должна быть
рассмотрена вся доступная информация по исследуемому веществу с тем, чтобы сфокусировать
планисследования для более успешного тестирования его токсикологических свойств и
минимизировать использование животных. Информация и рассмотрение способа действия
предполагаемого канцерогена (3, 8, 13. 14. 15, 16]. особенно важна, так как оптимальный план может
отличаться в зависимости от того, известно ли. что вещество является генотоксическим
канцерогеном или это только предполагается. Дальнейшие указания по оценке способа действия
можно найти в Руководстве N
p
116 [8].
Данные, которые будут содействовать разработке исследования, включают; идентичность,
химическая структура и физико-химические свойства исследуемого вещества; любая информация о
механизме действия: результаты любых invitro и invivo исследований токсичности, включая тесты на
генотоксичность; предполагаемое использованиеи вероятноевоздействие на человеческий
организм; доступные данные испытаний (Q)SAR на мутагенность / генотоксичность, канцерогенность и
другиетоксикологические свойстваструктурнородственныхвеществ:имеющиеся
токсикокинетические данные (однократная доза, а также кинетика повторной дозы, при наличии) и
данные, полученные из других исследований повторного воздействия. Измерение хронической
токсичности может быть проведено после получения первоначальных данных о токсичности от 28-
дневного и 90-дневного тестирования токсичности повторной дозы. Также полезную информацию
дают краткосрочные исследования стимуляции и активизации рака. Поэтапный подход к
исследованию на канцерогенность следует рассматривать как часть общей оценки возможного
неблагоприятного воздействия на здоровье определенного химического вещества [17,18,19,20].
Статистические методы,наиболее подходящие для анализа результатов, с учетом
экспериментального плана и цели, должны быть установлены до начала исследования. Вопросы для
рассмотрения включают: должна ли статистика включать в себя корректировку для выживаемости,
анализ рисков кумулятивной опухоли относительно продолжительности выживания, анализ времени
возникновенияопухоли и анализ в случае преждевременного прекращения жизни одной или
нескольких групп. Руководство по соответствующим статистическим исследованиям и ключевые
2