ГОСТ 32647—2014
протромбиновое время и время образования и активности тромболластина. Другие гематологические
параметры, таких как тельца Гейнца или другая атипичная морфология эритроцитов и
метгемоглобина могут быть измерены по мере необходимости в зависимости от токсичности
вещества. В целом, в зависимости от наблюдаемого и/или ожидаемого эффекта от данного вещества
должен использоваться гибкий подход. Если химические вещества оказывают влияние на
кроветворительную систему, можно также измерить число ретикулярных клеток и сделать цитологию
костного мозга, хотя они не обязательны для регулярного проведения.
Клинические биохимические измерения для исследований основного токсического воздействия
на ткани и особенно влияние на почки и печень следует проводить на пробах крови, полученных от
как минимум 10 самцов и 10 самок каждой группы за одинаковые временные интервалы, как
предписано для гематологических исследований, всегда используя одних и тех же животных. В
случае с мышами, могут потребоваться вспомогательные животные для того, чтобы провести все
необходимые клинические биохимические исследования. В исследованиях с не-грызунами. образцы
будут браться у меньшего количества животных (например. 4 животных каждого пола в каждой группе
при исследованиях собак), во время промежуточного взятия проб и по окончании исследования, как
описано для грызунов. Нет необходимости проводить измерения в три месяца, ни у грызунов, ни
у негрызунов, если за предыдущие 90 дней при аналогичном уровне дозы не наблюдалось
воздействия на клинические биохимические параметры. Рекомендуется’ голодание дляживотных (за
исключением мышей) вечером накануне забора крови. Необходимо исследовать приведенный список
параметров (38): глюкоза, моча (азот мочевины), креатинин, общий белок, альбумин, кальций,
натрий, калий, общийхолестерин,какминимумдваанализана
гепатоцеллюлярныйанализ (аланин-аминотрансфераза, аспартат-
аминотрансфераза. глютаминатдегидрогеназа. желчные кислоты) (39), и как минимум два
анализа на гепатобилиарный анализ (щелочная фосфатаза, гамма-глутаминтрансфераза.
5’- нуклеотидаза.общий билирубин,желчные кислоты) [40].Другие клинические
химические показатели, такие как триглицерид натощак, специфицескиегормоны и
холинэстераза могут быть измерены в случае необходимости в зависимости от токсичности
вещества. В целом необходим гибкий подход в зависимости от наблюдаемого и/или ожидаемого
воздействия каждого конкретного вещества.
Анализ мочи должен проводиться у всех исследуемых животных (10 самцов и 10 самок каждой
группы) на образцах, собранных за одинаковые промежутки времени, как и в случае с гематологией и
клинической химией. Нет необходимости проводить измерения в три месяца, если за предыдущие 90
дней при аналогичном уровне дозы не наблюдалось воздействияна мочу. Вэкспертные
рекомендации по исследованию клинической патологии был включен следующий список параметров
(27): внешний вид. объем, осмотическая концентрация раствора или относительная плотность. pH,
общий белок и глюкоза. Другие исследования включают кетон, уробилиноген. билирубин и скрытую
кровь. Дополнительные исследования могут быть использованы при необходимости расширить
изучение наблюдаемых воздействий.
Как правило, считается, что основные гематологические и клинические биохимические
параметры необходимо определять до начала терапии при исследованиях собак, но нет
необходимости их определять в исследованиях грызунов [39]. Однако, если исторические исходные
данные (см. п. 58) недостаточны, следует уделить внимание созданию таких данных.
4.1.3 Патология (макроскопическая аутопсия)
Все животные в исследовании, как правило, подвергаются полной, детальной макроскопической
аутопсии, которая включает тщательное исследование наружной поверхности тела, всех отверстий,
черепных, грудных и брюшных полостей и их содержимого. При этом мог быть сделан резерв (в
группах для промежуточных умерщвлений или во вспомогательных группах) для измерений,
ограниченныхотдельными,важнымипоказателями,такимикакнейротоксичностьили
иммунотоксичмость (см. п. 21). Этих животных не нужно подвергать аутопсии и дальнейшим
процедурам, описанным в последующих пунктах. Индикаторные животные могут требовать аутопсии в
каждом отдельном случае, на усмотрение руководителя исследования.
Значимые органы следует собрать у всех животных, исключая тех. которые упомянуты выше.
Надпочечник, мозг, придатки яичка, сердце, почки, печень, яичники, селезенка, яички, щитовидная
’Для ряда измерений в сыворотке и плазме, особенно глюкозы, ночное голодание является
предпочтительным. Основной причиной этого предпочтения является то, что увеличение изменчивости, которое
неизбежно возникло бы без голодания, маскировало бы более слабовыраженные эффекты и усложнило бы
интерпретацию. Однако следует отметить, что ночное голодание может влиять на общий обмен веществ
животных и, в частности, в исследованиях питания, может нарушить ежедневное воздействие исследуемого
вещества. Все животные должны осматриваться в одном и том же физиологическом состоянии и желательно
запланировать детальный или неврологический осмотр на день, отличный от дня клинических биохимических
проб.
9