ГОСТ 32587-2013
Регистрируют не менее двух хроматограмм каждого градуировочного раствора и проводят
градуировку хроматографа, устанавливая параметры градуировочной характеристики и время удер
живания охратоксина А. используя программное обеспечение к хроматографу.
Рассчитывают коэффициент корреляции и отклонения рассчитанных значений массовой кон
центрации охратоксина А в каждой градуировочной точке от фактического значения в соответствии с
процедурой приготовления градуировочных растворов (см. 5.3.3.3).
Градуировку считают приемлемой, если:
- коэффициент корреляции не менее 0.998;
- относительное отклонение рассчитанного значения массовой концентрации охратоксина А
от фактического значения не более ± 10 %. Вместо относительного отклонения приемлемость гра
дуировочной характеристики может быть оценена по относительному стандартному отклонению,
ко торое не должно превышать 5 %.
5.3.8 Контроль стабильности градуировочной характеристики
Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят ежедневно перед началом
работы.
В качестве контрольного раствора используют раствор охратоксина А в подвижной фазе, при
готовленный аналогично 5.3.3.3. Массовую концентрацию охратоксина А в контрольном образце вы
бирают. исходя из предполагаемого содержания охратоксина А в испытуемых пробах; рекомендуется
использование раствора охратоксина А массовой концентрации 20 нг/см .
Регистрируют не менее двух хроматограмм контрольного раствора и идентифицируют пик ох
ратоксина А по времени удерживания при ширине окна идентификации 5 %. внося при необходимо сти
программную коррекцию времени удерживания пика, и при помощи градуировочной характери стики
рассчитывают массовую концентрацию охратоксина А для каждого ввода.
Сходимость значений времени удерживания и значений массовой концентрации охратоксина
А проверяют по формулам:
!’У ’-й
0,05,(1)
гдеи t2- время удерживания пика охратоксина А на первой и второй хроматограммах со
ответственно. мин;
Г - среднеарифметическое значение fi и t2. мин.
С* \.\ <
о,07 .(2)
С к
где СХ1 и Сп - массовые концентрации охратоксина А в контрольном растворе по первой и
второй хроматограммам соответственно, нг/см3;
Ск - среднеарифметическое значений С*, и Са . нг/см3.
Градуировочная зависимость признается стабильной, если выполняется условие
I С’ - С I
— —
------
- ^ 0,12,
(3)
где С - массовая концентрация охратоксина А в контрольном растворе, нг/см3.
Если условие (3) не выполняется, то процедуру контроля повторяют. Результаты повторного
контроля считают окончательными, и градуировку хроматографа по 5.3.7 проводят заново.
П р и м е ч а н и е - Повторная градуировка хроматографа, как правило, требуется при изме
нении эффективности хроматографической системы или чувствительности детектора (например, по
сле проведения ремонта или длительного простоя хроматографа).
5.3.9 Контроль холостой реактивной пробы
Испытание холостой реактивной пробы проводят перед испытанием исследуемых проб.
В плоскодонную колбу вместимостью 50 см3помещают 30 см3хлороформа и 2.5 см3раствора
уксусной кислоты по 5.3.2.2. тщательно перемешивают и осторожно отбирают из нижнего слоя 20 см3
хлороформа в остродонную колбу для упаривания вместимостью 50 см3, не допуская попадания в
нее воды.
Остродонную колбу помещают в ротационный испаритель и упаривают в вакууме до сухого
остатка при температуре водяной бани от 40 еС до 45 °С. Продолжают выполнять все операции по
5.4.3. получая таким образом концентрат холостой пробы. Проводят хроматографическое исследова
ние полученного концентрата по 5.4.4. Если на хроматограмме присутствуют пики, по времени удер
живания близкие к пику охратоксина А. то находят и устраняют причины загрязнения холостой пробы
(реактивы или посуда).
6