ГОСТ 32587-2013
6.4.6 Количественное определение
Подготовленный по 6.4.2 раствор пробы сразу же вводят в хроматограф. Объем дозирования
должен быть равен объему дозирования градуировочных растворов при проведении градуировки
хроматографа (см. 6.4.4).
Измеряют площадь или высоту пика охратоксина А на хроматограмме пробы и при помощи
градуировочной характеристики (см. 6.4.4) находят его массу (т,. нг) в инжектируемом объеме.
Если значение отклика охратоксина А на хроматограмме пробы выходит за пределы градуи
ровочной характеристики, то подготовленный раствор пробы разбавляют или концентрируют перед
вводом в хроматограф, учитывая этот факт при расчете результатов измерений по 6.5.
6.4.7 Подтверждение
При необходимости подтверждают идентификацию пика охратоксина А по его исчезновению и
одновременному появлению пика со временем удерживания, совпадающим с временем удерживания
пика метилового эфира охратоксина А в результате дериватизации с трифторидом бора.
Отбирают 0.5 см1 раствора, приготовленного по 6.4.2, в остродонную колбу, упаривают до
сухого остатка на ротационном испарителе (см. 5.2.7). Сухой остаток растворяют в 1см3хлористого
метилена (см. 6.2.4) и добавляют 2 см3раствора трифторида бора в метаноле (см. 6.2.12).
Колбу плотно закрывают пробкой и нагревают на водяной бане при температуре от 50 С до
60 °С в течение 15 мин. После охлаждения раствор переносят в делительную воронку вместимостью
50 см3, содержащую 30 см3воды, встряхивают по 30 с тремя порциями хлористого метилена по 10
см3каждая. Объединяют органические фазы после каждой экстракции в другой делительной воронке
вместимостью 50 см3, добавляют для промывания20 см3воды и встряхивают в течение 30 с.
Фильтруют органическую фазу через слой безводного сернокислого натрия (см. 5.2.14) в ост
родонную колбу, упаривают до сухого остатка, растворяют в 500 мм3подвижной фазы (см. 6.2.10) и
регистрируют хроматограмму полученного раствора в условиях по 6.4.3.
Для нахождения времени удерживания метилового эфира охратоксина А и проверки полноты
дериватизации в указанных выше условиях проводят обработку промежуточного раствора по 6.2.15.
6.5 Обработка результатов испытаний
Массовую долю охратоксина А X. млн1 вычисляют по формуле
2
V -V<m
(15)
гдеV\ - объем толуола, взятый для экстракции по 6.4.2, см3(100 см3);
Vj - объем раствора пробы, подготовленного по 6.4.2, см3(1 см3);
т , - масса охратоксина А. установленная по 6.4.6. нг.
V2 - объем аликвоты центрифугата по 6.4.2, см3 (50 см3);
V*- объем дозирования подготовленного раствора пробы, см3;
т - масса пробы, взятой для испытаний, г;
10‘3- коэффициент согласования размерности единиц массы.
6.6 Метрологические характеристики
6.6.1 Результаты межлабораторных испытаний по определению точности метода, проведен
ных в соответствии с ГОСТ ISO 5725-2. приведены в Приложении Б. Значения, полученные в резуль
тате межлабораторных испытаний могут быть не применимы в диапазонах содержаний охратоксина
А и для матриц, отличающихся от указанных в приложении Б.
6.6.2 Абсолютное расхождение между двумя результатами единичных испытаний, получен
ными в условиях повторяемости может превышать предел повторяемости г не более чем в 5 % слу
чаев.
Значения пределов повторяемости гпри анализе пшеничной муки из цельного зерна:
г=0,18 мкг/кг (0,00018 млн’1) при X =0,41 мкг/кг (0.00041 млн ’);
г=0,70 мкг/кг (0.00070 млн’1) при X =1,23 мкг/кг (0.00123 млн ’).
6.6.3Абсолютное расхождение между двумя результатами единичных испытаний, получен
ными в условиях воспроизводимости может превышать предел воспроизводимости R не более чем
в 5 % случаев.
Значения пределов воспроизводимости R при анализе пшеничной муки из цельного зерна:
R=0,30 мкг/кг (0.00030 млн’1)при X =0.41 мкг/кг (0,00041 млн’1);
R=1,10 мкг/кг (0.00110 млн’1)при X =1.23 мкг/кг (0.00123 млн’1).
6.7 Контроль качества результатов измерений - по 5.7.
6.8 Оформление результатов испытаний - по 5.8.
14