ГОСТ 32587-2013
Т а б л и ц а 1
НомерОбьемисходногораствора по5.3.3.1,
раствора см3
Номинальное значение массовой концентрации.
нг/сы5
15.0100
22.0 40
31.0 20
40.5 10
Содержимое колбы разбавляют до метки подвижной фазой no 5.3.2.1 в соответствии с табли
цей 1.
Срок хранения градуировочных растворов - не более семи дней.
П р и м е ч а н и е - При необходимости допускается приготовление аналогичным способом
растворов охратоксина А других концентраций в диапазоне линейности градуировочной характери
стики (см. 5.3.7).
5.3.3.4 Все растворы охратоксина А хранят в холодильнике при температуре не выше 6 °С или
в морозильной камере при температуре не выше минус 18 °С в стеклянных или фторопластовых со
судах.
Фактическое значение массовой концентрации охратоксина А в растворах по 5.3.3.1 - 5.3.3.3
вычисляют, исходя из значений массовой концентрации охратоксина А по паспорту стандартного об
разца.
Перед использованием растворы выдерживают до достижения комнатной температуры.
5.3.4 Подготовка стеклянной хроматографической колонки
Стеклянную хроматографическую колонку готовят непосредственно перед проведением испы
тания.
В стакан вместимостью 50 см3помещают (1.0 ± 0.1) г силикагеля (см. 5.2.37). добавляют от 10
до 15 см3хлороформа (см. 5.2.18) и тщательно перемешивают. Полученную суспензию выдерживают
в стакане в течение 4 - 5 мин и затем в несколько приемов через воронку диаметром 25 или 36 мм
переносят суспензию силикагеля в колонку, предварительно поместив на ее дно кусочек ваты.
После оседания силикагеля в колонке на него сверху насыпают слоем около 2 г безводного
сернокислого натрия (см. 5.2.14).
В процессе работы с колонкой нельзя допускать высыхания сорбента, для чего необходимо
поддерживать над осушителем слой растворителя. В состоянии готовности колонка должна быть за
полнена хлороформом выше уровня сорбента, закрыта стеклянной пришлифованной пробкой, а вы
ход колонки должен быть погружен в хлороформ.
Подготовленную колонку используют однократно.
5.3.5 Подготовка хроматографа
Подготовку хроматографа к измерениям проводят в соответствии с руководством (инструкци
ей) по эксплуатации.
Устанавливают рабочие длины волн возбуждения и регистрации флуоресценции (см. 5.2.1).
Скорость подачи подвижной фазы задают в зависимости от типоразмеров колонки, руководствуясь
указаниями изготовителя хроматографа и колонки. Например, для колонки, указанной в 5.2.3. реко
мендуемая объемная скорость подвижной фазы составляет 200 мм^мин. При наличии термостата
колонок устанавливают температуру (25 ♦ 1) °С.
5.3.6 Условия хроматографического анализа
Если используют хроматографическую колонку по 5.2.3 и подвижную фазу по 6.2.10. то хрома
тографический анализ проводят в следующих условиях:
-длина волны возбуждения флуоресценции......................330 нм;
- длина волны регистрации флуоресценции.......................465 нм;
- скорость потока подвижной фазы............................200 мм3/мин;
- объем дозирования........................................................... 20 мм3;
- температура термостата колонки (при его наличии)...(25 ± 1) °С.
При использовании колонок других типоразмеров скорость потока подвижной фазы и объем
дозирования выбирают в соответствии с указаниями изготовителя хроматографа и колонки.
5.3.7 Градуировка хроматографа
Диапазон линейности градуировочной характеристики составляет от 10 до 100 нг/см3. В каче
стве образцов для градуировки хроматографа используют градуировочные растворы охратоксина А
по 5.3.3.3.
5