ГОСТ 32368—2013
- данные побиологическим макроскопическим наблюдениям, включая вторичныеполовыепризна
ки. плодовитость ивителлогенин;
- результаты анализаданных предпочтительно втабличной и графической форме;
- частота любых необычных реакций рыбок илюбых видимых эффектов, вызванных исследуемым
веществом.
6.3 Руководство по интерпретации и принятии результатов тестирования
6.3.1 В данном разделе обсуждаются параметры, которые необходимо учитыватьдля интерпре
тации результатов тестирования в отношении различных измеряемых эффектов. Результаты необхо
димо интерпретироватьсосторожностью, когда кажется, что исследуемое веществоявляется причиной
появления признаковтоксичности или влияет на общеесостояние экспериментальныхживотных.
6.3.2 В ходе предварительного теста поопределению концентрации для того, чтобы можно было
надежно интерпретировать данные, следует обратить внимание на то. чтобы не были превышены
максимально переносимые концентрации. Важно применять по меньшей мере одну концентрацию,
которая не вызывает каких-либо признаковтоксичности. Симптомы заболевания и признаки токсичнос ти
анализируют и включают в подробный отчет. Например, возможно, что на образование VTG у самок
могут также повлиять общая токсичность и неэндокринные токсические воздействия, например гепато-
токсичноть. Интерпретация полученных эффектов может бытьдополнена другими уровнями загрязне
ний. которые несвязаны ссистемнойтоксичностью.
6.3.3 Есть несколько аспектов, которые необходимо рассмотреть для принятия результатов
тестов. УровниVTG в контрольныхгруппах самцов исамокдолжны отличаться примерно натри порядка у
толстоголового гольяна и данио рерио. и на один порядок у японской медаки. Примерный диапазон
значений, с которыми сталкиваются в контрольных группах, доступны в отчетах проверки точности.
Высокие значенияVTGу контрольныхсамцовмогутпоставитьподугрозуточностьанализа иего способ
ностьобнаружитьслабых антагонистовэстрогена. Низкие значения VTG у контрольныхсамокконтроля
могутпоставитьподугрозучувствительностьанализа и егоспособностьобнаружить ингибиторыарома-
тазы и антагонистов эстрогена. Исследования по проверке точности проводилисьдля целей написания
руководства.
6.3.4 Что касается количественного определения образования икры, то это тот случай, когда
допускаются важные изменения [коэффициент изменчивости (CV) может колебаться от 20 %до 60 %].
которые влияют на способность испытания обнаружить существенное уменьшение образования икры,
меньшечем на 70%. посколькукоэффициентизменчивостиприближается к50% или более. Когдакоэф
фициент изменчивости ограничен нижними значениями (приблизительно от 20 % до 30 %), то у испыта
ния будет приемлемая сила (80 %) для обнаружения от 40 % до 50 % уменьшения образования икры. Вид
испытания, используемый для толстоголового гольяна, включая четыре воспроизведения на
уровень воздействия, должен придать больше власти итогам испытания репродуктивной способности, по
сравнению с видом исследований с двумя воспроизведениями.
6.3.5 Если лаборатория не выполняла ранее этот анализ или были допущены значимые измене
ния (например, вида рыбили поставщика), желательно, чтобы было проведено исследование техничес
кой компетенции. Рекомендуется использовать вещества, охватывающие диапазон воздействий или
влияющие на некоторые измеряемые параметры во время теста. Каждой лаборатории рекомендуется
разрабатыватьсвою собственную базуданныхпо контрольным самцам исамкам иделатьтестыс поло
жительным контролем для эстрогенной активности (например. 17|^эстрадиола на уровне 100 нг/л. или
другим известнымслабым агонистом), вызывающим увеличениеVTG усамцов, положительным контро
лем для ингибирования ароматазы (например, фадрозол и прохлораз при 300 мг/л), вызывающим
сни жение VTG у самок, и положительным контролем для андрогенной активности (17|И-ренболона в
дозе 5 мг/л), в результатеиндукции вторичных половыхпризнаковусамоктолстоголовогогольяна
ияпонской медаки. Все эти данные можно сравнить с имеющимися данными по проверке
исследованийдля обес печения компетентности лаборатории.
6.3.6 Вообще, измерения вителлогенина должны считаться положительными, если есть статис
тически значимое увеличение VTG у самцов (р < 0.05). или статистически значимое снижение у самок (р
< 0.05) по крайней мере при самых высоких концентрациях по сравнению с контрольной группой при
отсутствии признаков общей токсичности. Положительный результат далее подтверждается демон
страцией биологически вероятной зависимости между дозой и динамической характеристикой. Как
упомянуто ранее, уменьшение вителлогенина может не всегда иметь эндокринное происхождение;
однако положительный результат должен интерпретироваться как доказательство эндокринной
деятельности in vivo иобычно является поводомдля дальнейших исследований.
9