ГОСТ 32031-2012
Посевы на второй селективной среде культивируют при соответствующей температуре и про
сматривают на наличие роста колоний с характерным для бактерий рода Listeria ростом после опре
деленного времени.
5.4Идентификация отобранных колоний
Пересев колоний, полученных по 5.3. с характерным ростом для бактерий рода Listeria и вида
Listeria monocytogenes на плотные питательные среды и культивирование при температуре (37
±
1) °С
в течение (24
±
3) ч и их идентификация по соответствующим морфологическим, культуральным и
биохимическим признакам.
6Питательные среды, тест-системы и реактивы
6.1 Общие требования
Состав и приготовление питательных сред и реактивов - в соответствии с приложением Б.
6.2 Селективные среды первичного обогащения
В качестве селективных сред первичного обогащения могут быть использованы следующие
среды.
6.2.1 Бульон Фразера полуконцентрированный - по Б.1.1.
6.2.2 Селективный накопительный бульон UVM - по Б.1.2.
6.2.3 Питательный бульон для выделения и культивирования листерий (ПБ
Л
I) - по Б.1.3.
6.3 Селективные среды вторичного обогащения
В качестве селективных сред вторичного обогащения могут быть использованы следующие
среды.
6.3.1 Бульон Фразера - по Б.2.1.
6.3.2 Селективный накопительный бульон (UVM II) - по Б.2.2.
6.3.3 Питательный бульон для выделения и культивирования листерий (ПБ
Л
II) - по Б.2.3.
6.4Селективные плотные среды
6.4.1 Агар Listeria по Оттавиани и Агости (ALOA)- по Б.3.1.1.
6.4.2 Бриллианс Listeria агар (BRILLIANCE LISTERIA agar) - по Б.3.1.2.
В качестве второй среды необходимо использовать одну из следующих:
6.4.3 Оксфорд агар - по Б.3.2.1.
6.4.4 Палкам агар - по Б.3.2.2.
6.4.5 Питательный агар для выделения листерий (ПА
Л
) - по Б.3.2.3.
6.5 Питательные среды для изучения культурально-морфологических свойств бакте
рий рода Listeria
6.5.1 Плотные питательные среды
6.5.1.1 Триптон-соевый агар с дрожжевым экстрактом (TSYEA) - по Б.4.1.1.
6.5.1.2 Трипказо-соевый агар (TSA) - по Б.4.1.2.
6.5.1.3 Мясопептонный агар (МПА) - по Б.4.1.3.
6.5.2 Жидкие питательные среды
6.5.2.1 Триптон-соевый бульон с дрожжевым экстрактом (TSYEB) - по Б.4.2.1.
6.5.2.2 Трипказо-соевый бульон (TSB) - по Б.4.2.2.
6.5.2.3 Мясопептонный бульон (МПБ) - по Б.4.2.3.
6.6 Среды и реактивы для идентификации бактерий рода Listeria
6.6.1 Раствор с объемной долей перекиси водорода 3 % - по ГОСТ 10444.1.
6.6.2 Растворы и реактивы для окраски по Граму - по ГОСТ 10444.1.
6.6.3 Коммерческие наборы для окраски по Граму - согласно инструкции изготовителя.
6.6.4 Среда для определения подвижности бактерий - по Б.8.
6.6.5 Среда для определения лецитиназной активности - по Б.10.1 и Б.10.2.
6.7 Среды и реактивы для идентификации бактерий вида Listeria monocytogenes
6.7.1 Среда и реактив для определения Э-гемолитической активности
6.7.1.1 Кровяной агар - по Б.5.
6.7.1.2 Суспензия из эритроцитов барана - по Б.6.
6.7.2 Буфер фосфатно-солевой - по Б.11.
6.7.3 Среда для проведения КАМП-теста - по Б.9.
6.7.4 Среды для определения ферментативных свойств культуры - по Б.7.1 и Б.7.2.
6.7.5 Углеводы - по Б.7.1.2.
6.7.5.1 Рамноза.
6.7.5.2 Ксилоза.
6.7.5.3 альфа-метил D-маннозид (Methyl a-D-mannopyranoside).
3