ГОСТ 32031-2012
Приготовление:
В расплавленную и охлажденную на водяной бане до температуры (47
±
2) °С основу среды (см.
Б.3.2.1.1) добавляют, тщательно перемешивая, раствор селективной добавки (см. Б.3.2.1.2).
В стерильные чашки Петри разливают свежеприготовленную готовую среду приблизительно
по 15-20 см3 и дают агару затвердеть.
Непосредственно перед применением среда в чашках должна быть подсушена в соответствии
с ГОСТ ISO 11133-1.
Б.3.2.2 Палкам агар (PALCAM agar)
Б.3.2.2.1 Основа среды
Состав:
пептон23.0 г
крахмал1.0 г
хлорид натрия5.0 г
дрожжевой экстракт3.0 г
D-глюкоза0,5 г
D-маннитол10.0 г
эскулин0.8 г
цитрат аммонийного железа (III)0.5 г
фенол красный0.08 г
хлорид лития15.0 г
агар9.0-18.0 г
дистиллированная вода960.0 см3
Приготовление:
Компоненты или сухую готовую среду растворяют в дистиллированной воде при нагревании.
Устанавливают pH среды таким образом, чтобы после стерилизации его значение составляло
(7,2
±
0,2). Разливают основу среды в колбы или флаконы соответствующего объема и стерилизуют в
автоклаве при температуре 121 °С в течение 15 мин.
Б.3.2.2.2 Раствор сульфата полимиксина В
Состав:
полимиксина В сульфат (100000 е.а.)0.1 г
дистиллированная вода100 см3
В зависимости от плотности среды.
Приготовление:
Растворяют полимиксина В сульфат в воде. Стерилизуют раствор фильтрованием.
Б.3.2.2.3 Раствор гидрохлорида акрифлавина
Состав:
акрифлавина гидрохлорид0,05 г
дистиллированная вода100 см3
Приготовление:
Растворяют гидрохлорид акрифлавина в дистиллированной воде. Стерилизуют раствор
фильтрованием.
Б.3.2.2.4 Раствор пентагидрата цефтазидима натрия
Состав:
пентагидрат цефтазидима натрия0.116 г
дистиллированная вода100 см3
Приготовление:
Растворяют пентагидрат цефтазидим натрия в воде. Стерилизуют раствор фильтрованием.
Б.3.2.2.5 Готовая среда
Состав:
основа агара (В.3.3.1)960.0 см3
раствор сульфата полимиксина В (В.3.3.2)10.0 см3
раствор акрифлавина гидрохлорида (В.3.3.3)10,0 см3
раствор пентагидрата цефтазидима натрия (В.3.3.4)20.0 см3
Приготовление:
В расплавленную и охлажденную на водяной бане до (47
±
2) °С основу среды (см. Б.3.2.2.1),
добавляют, тщательно перемешивая, растворы добавок (см. Б.3.2.2.2 - Б.3.2.2.3).
19