ГОСТ 32031-2012
3 Термины и определения
В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определения
ми:
3.1 бактерии рода Listeria: Микроорганизмы, которые образуют типичные колонии на плот
ных селективных средах и являются грамположительными неспорообразующими короткими палочка
ми, иногда почти коккоподобными, располагающимися одиночно или короткими цепочками, реже об
разующие длинные нити.
3.2 Listeria monocytogenes: Микроорганизмы, которые образуют типичные колонии на плот
ных селективных средах и идентифицируемые по морфологическим, культуральным и биохимиче
ским свойствам.
П р и м е ч а н и е - Описание и методы определения морфологических, культуральных и био
химических характеристик этих микроорганизмов приведены в настоящем стандарте.
3.3 выявление Listeria monocytogenes: Определение наличия или отсутствия Listeria
monocytogenes в определенной массе или объеме продукта в соответствии с настоящим стандартом.
4 Сокращения
В настоящем стандарте используют следующие сокращения:
ALOA - агар Listeria по Оттавиани и Агости:
ГРМ - гидролизат рыбной муки;
ИФА - иммуноферментный анализ;
МПА - мясопептонный агар;
МПБ - мясопептонный бульон;
ПА
Л
- питательный агар для выделения листерий;
ПБ
Л
- питательный бульон для выделения листерий;
ПЦР - полимеразная цепная реакция:
TSYEA - триптон-соевый агар с дрожжевым экстрактом;
TSYEB - триптон-соевый бульон с дрожжевым экстрактом.
5 Сущность метода
Метод выявления бактерий L. monocytogenes в определенной массе или объеме продукта со
стоит из четырех последовательных этапов (см. 5.1.5,2. 5.3. 5.4 иприложение А).
5.1Первичное обогащение анализируемой пробы в жидкой среде со сниженной концентраци
ей селективных компонентов (полуконцентрированный бульон Фразера) при температуре 30 °С в те
чение 24 ч.
П р и м е ч а н и е - Бактерии рода Listeria в продукте могут находиться в небольшом количе
стве, очень часто на фоне значительного количества микроорганизмов других родов. Поэтому для
выявления небольшого количества бактерий рода Listeria, а так же «поврежденных» клеток в пробе
необходим этап селективного обогащения на среде с пониженной концентрацией селективных компо
нентов.
5.2 Вторичное обогащение посевного материала, полученного по 5.1 в жидкой среде с полной
концентрацией селективных компонентов (бульон Фразера) при температуре (37
±
1) °С в течение 48
ч.
5.3 Пересев посевного материала, полученного по 5.1 и 5.2. параллельно на две плотные се
лективные среды:
а) первая среда (обязательная): ALOA;
б) вторая среда: одна из плотных селективных сред, на выбор лаборатории, дополнительно к
агару по 5.3 (а), такие как Оксфорд агар. Палкам агар или ПА
Л
.
Посевы на ALOA культивируют при температуре (37 ♦ 1) °С и просматривают через (24
±
3) ч,
а при необходимости еще через (24
±
3) ч. контролируя наличие роста характерных для L.
monocytogenes колоний.
2