ГОСТ 32031-2012
В стерильные чашки Петри разливают свежеприготовленную готовую среду приблизительно
по 15-20 см3 идают агару затвердеть.
Непосредственно перед применением среда в чашках должна быть подсушена в соответствии
с ГОСТ ISO 11133-1.
Б.3.2.3 Питательный агар для выделения листерий (ПА
Л
)
Б.3.2.3.1 Основа среды
Состав:
гидролизат казеина панкреатический10,0 г
гидролизат рыбной муки панкреатический15.0 г
гидролизат автолиэованных дрожжей2.0 г
хлорид натрия3.5 г
хлорид лития15.0 г
цитрат аммонийного железа0.5 г
эскулин0.8 г
агар13,0 г
дистиллированная вода до 1000.0 см3
Приготовление:
Компоненты растворяют в дистиллированной воде при нагревании и тщательно перемешива
ют до полного растворения. Устанавливают pH (7.0
±
0.2) ед. pH и стерилизуют в автоклаве при тем
пературе (121
±
1) °С в течение 15 мин.
Б.3.2.3.2 Раствор селективной добавки
Состав:
налидиксовая кислота20мг
акрифлавин гидрохлорида 10 мг
полимиксин В сульфат10мг
стерильная дистиллированная вода 10 см3
Приготовление:
Налидиксовую кислоту, акрифлавин и полимиксин В сульфат растворяют в стерильном фи
зиологическом растворе.
Б.3.2.3.3 Готовая среда
Состав:
основа среды (см. Б.3.2.3.1)1000 см3
раствор селективной добавки (см. Б.3.2.3.2) 4.44 см3
Приготовление:
К расплавленной основе среды добавляют с соблюдением правил асептики раствор селек
тивной добавки. Готовую среду разливают в стерильные чашки Петри и хранят не более 22 сут в за
щищенном от света месте при температуре не выше 8 °С.
Б.4 Питательные среды, используемые для изучения культурально-морфологических
свойств
Б.4.1 Плотные питательные среды
Б.4.1.1 Триптон-соевыи агар с дрожжевым экстрактом (TSYEA)
Состав:
триптон или панкреатический гидролизат казеина17,0 г
соевый пептон3.0 г
хлорид натрия5.0 г
калий фосфорнокислый двузамещенный2.5 г
глюкоза2.5 г
дрожжевой экстракт6.0 г
агар9,0-18,0 г’
дистиллированная вода1000.0 см3
Приготовление:
Растворяют компоненты или сухую готовую среду в дистиллированной воде, нагревая. При
необходимости установить pH так, чтобы после стерилизации его значение соответствовало (7.3
±
0.2) ед. pH при температуре 25 °С. Среду необходимого объема разливают в пробирки. Стерилизуют в
автоклаве при температуре 121 °С в течении 15 мин. Скашивают агар. Для приготовления чашек с
агаром готовую среду разливают в стерильные чашки Петри в объеме, необходимом для проведения
теста. Дают агару застыть.
Б.4.1.2 Трипказо-соевый агар (TSA)
Состав среды:
20