ГОСТ 32031-2012
Состав:
полимиксмна В сульфат
дистиллированная вода
Приготовление:
’ 925 см3, если используют раствор амфотерицина В.
76700.0 е.а.
5.0 см3
Полимиксин В сульфат растворяют в 5 см дистиллированной воды и стерилизуют раствор
путем фильтрования через мембрану с диаметром пор 0.45 мкм.
Б.3.1.1.3 Растворы антибиотиков
Б.3.1.1.3.1 Раствор циклогексимида
Состав:
циклогексимид0.05 г
этанол2.5 см3
дистиллированная вода 2.5 см3
Приготовление
Циклогексимид растворяют в 2.5 см3этанола, затем добавляют 2.5 см3дистиллированной во
ды и стерилизуют раствор путем фильтрования через мембрану с диаметром пор 0.45 мкм.
Б.3.1.1.3.2 Раствор амфотерицина В (используется, как альтернатива для раствора циклогек
симида)
Состав:
амфотерицин В0.01 г
соляная кислота (HCI) (1 моль/дм3)2.5 см3
диметилформамид (DMF)7.5 см3
Приготовление:
Амфотерицин растворяют в растворе соляной кислоты (HCI) и диметилформамида (DMF) и
стерилизуют раствор путем фильтрования через мембрану с диаметром пор 0.45 мкм.
П р е д у п р е ж д е н и е - Раствор HCI и диметилформамид (DMF) очень токсичен. Обра
щаться с осторожностью.
Б.3.1.1.4 Дифференциальная добавка
Состав:
L-a-фосфатидилинозитал (Sigma Р 6636*)2.0 г
холодная дистиллированная вода50 см3
Приготовление:
L-a-фосфатидилинозитал (Sigma Р 6636®) растворяют в холодной дистиллированной воде.
Раствор перемешивают в течение 30 мин до получения гомогенной суспензии. Автоклавируют при
температуре 121 °С в течение 15 мин с последующим охлаждением до температуры (47
±
2) °С.
Б.3.1.1.5 Готовая среда
Состав среды:
основа среды (см. Б.3.1.1.1)930.0 (см3)
раствор налидиксовой кислоты (см. Б.3.1.1.2.1) 5.0 см3
раствор цефтазидима (см. Б.3.1.1.2.2)5.0 см3
раствор полимиксина В сульфата (см. Б.3.1.1.2.3)5.0 см3
раствор циклогексимида (см. Б.3.1.1.3.1) 5.0 см3
или амфотерицина В (см. Б.3.1.1.3.2)10,0 см3
дифференциальная добавка (см. Б.3.1.1.4) 50.0 см3
Приготовление:
В расплавленную и охлажденную на водяной бане до температуры (47
±
2) °С основу среды, до
бавляют. тщательно перемешивая после каждого добавления, растворы ингибиторов, антибиотиков и
добавок.
pH готовой среды должен составлять (7.2
±
0.2) ед. pH.
Готовая среда должна быть гомогенной и непрозрачной.
В стерильные чашки Петри разливают свежеприготовленную готовую среду приблизительно
по 15-20 см3 и дают агару затвердеть.
Непосредственно перед применением среда в чашках должна быть подсушена в соответствии
с ГОСТ ISO 11133-1.
Б.3.1.2 Бриллианс Listeria агар (BRILLIANCE LISTERIA agar)
Б.3.1.2.1 Основа среды
15