ГОСТ 31928—2013
азида натрияи 10.0 см3раствора2-. 3-. 5-трифенилтетразолийхлорида, хорошо перемешиваютиразли
вают почашкам Петри.
Срокхранения среды при температуре (4 ♦2) °С — не более 7сут.
6.8.2 Канамицин азидно-эскулиновый агар (КАЭ-агар)
20.0 гпептона из казеина. 25.0 см3дрожжевого экстракта. 5.0 г натрия хлорида, 1,0 гнатрия лимон-
нокислого.0.5гжелеза(Ш) — аммониягидроцитрата, 1,0гэсхулина,(15.0 .♦3,0)гагарапомещаютвмер-
ную колбувместимостью 1000см3,доливаютдистиллированной водой до метки. Растворяютсоставные
части при нагревании, охлаждают, устанавливают pH таким образом, чтобы после стерилизации при
температуре 25 °С он составлял (7.1 *0.1). Стерилизуют притемпературе (121
1
1)°С в течение 15 мин,
охлаждаютдо 50 ’С. добавляют 1.5 см3раствора азида натрия и0.4 см3раствора канамицина сульфата
массовой концентрацией 50 г/дм3или 0.2 см3раствора канамицина сульфата массовой концентрацией
100 г/дм3 и разливают почашкам Петри.
Срокхранения среды при температуре (4 i 2)°С — не более 7сут.
6.8.3 Щелочная полимиксиновая среда
6.8.3.1 Основасреды
К400 см3 мясо-пептонного бульона по ГОСТ 10444.1 добавляют 5 г натрия хлорида. 10 гглюкозы,
10 см3дрожжевого экстракта.
6.8.3.2 Основу среды стерилизуют при температуре (110
±
1) °С в течение 12 мин. охлаждают и
добавляют 250 см3раствора натрия карбоната массовой концентрацией 21.2 г/дм3и 250 см3раствора
бикарбоната натрия массовой концентрацией 10 г/дм3. Устанавливают pH таким образом, чтобы при
температуре 25 °С он составлял (10.1
±
0,1). После этого к среде добавляют 200000 ЕД полимиксина М
сульфата. 5.0 смэ спиртового раствора бромтимоловогосинего.
Непосредственно перед использованием среду разливают по 5 см3 в стерильные пробирки. Рас
творы пол имиксин В сульфата или полимиксин Мсульфатаготовятнепосредственнопередиспользова
нием. для этого во флакон со стерильным антибиотиком вносят 5 или 10 см3 стерильной
дистиллированной воды.
Срокхранения среды в защищенном отсвета месте при температуре (4 i 2)5С — не более 7сут.
6.8.4 Молочно-ингибиторная среда (МИС)
К 850 см3расплавленного и охлажденного до 50 °С мясо-пептонного агара, приготовленного по
ГОСТ 10444.1. добавляют 150 см3обезжиренного молока, приготовленного по ГОСТ 10444.1. 12.5 см3
раствора кристаллического фиолетового, 10,0 см3раствора калия теллурита массовой концентрацией
20 г/дм3,200000 ЕД полимиксина Мсульфата.
Допускается взамен раствора калия теллурита добавлять в среду5.0 см3 раствора 2-. 3-. 5-трифе-
нилтетразолийхлорида.
Среду не стерилизуют, разливают в стерильные чашки Петри.
Срокхранения среды при температуре (4
±
2) °С — не более 10сут.
6.9 Приготовление питательных среддля культивирования осмотолерантных дрожжей
6.9.1 Средуагаризованнуюдля выделения дрожжей готовят по ГОСТ 28805.
15.0 г агарадобавляютк 345см3дистиллированной воды иоставляютна 30 миндлянабуханияага
ра. Затем расплавляютпри нагреванииидобавляют20.0гглюкозы.25см3дрожжевогоэкстракта. В полу
ченнойсмеси при нагревании наводяной бане постепенно растворяют610,0 г сахара-рафинада. После
расплавлениясахарасмесьохлаждаютдо (5015)°С.УстанавливаютpHсреды такимобразом, чтобыон
составлял (5.8
±
0.1) при температуре (25 ♦.1)°С. Питательную среду разливаютв колбы и стерилизуют
текучим паром в течение 30 мин.
6.9.2 Солодовое агаризованное сусло с сахарозой
К500 см3солодовогосусла, приготовленного по ГОСТ 10444.1. добавляют420,0 г сахара-рафина
да, нагревая перемешиваютдо полногорастворения, фильтруют, охлаждаютдо (50
±
5) ®С.Устанавли
вают с помощью молочной кислоты pH так. чтобы он составлял (3.6 i 0.1) при температуре (25 z 1) °С.
Сусло ссахарозой разливаютв колбы и стерилизуют текучим паром втечение 30 мин.
Приготовление агаризованногосусла: к 500 см3солодового сусла с pH (3.6
±
0,1)добавляют 30,0 г
агара, нагревают, приперемешиваниирасплавляютагар. Средуфильтруюти разливают вколбы, затем
стерилизуют текучим паром в точение 30 мин.
Непосредственнопередпосевом агаризованноесусло расплавляютнаводяной бане, а солодовое
сусло нагреваютсахарозой до температуры (50 i 5) °С идве эти части смешивают. Питательную среду
разливают в колбы и стерилизуют текучим паром втечение 30 мин.
7