ГОСТ 31928—2013
1
В случаехранениягидролизованноемолокостерилизуютвавтоклаве при температуре(121
1
1)вС
в течение 15мин.
6.2.7 Агарс гидролизованным молоком готовят по ГОСТ 10444.11.
К1000см3гидролизованногомолокаприбавляют 15гагара. Средунагреваютдополногорастворе
нияагараи фильтруютчерезвату, разливаютв пробиркиили колбы, стерилизуютв автоклаве при темпе
ратуре (1211)°С в течение 10 мин.
6.3 Приготовление питательных среддля культивирования Bifidobacterium
6.3.1 Приготовление модифицированной печеночной среды Блаурокка
0.5 кг свежей говяжьей печениочищаютот пленок ипротоков, измельчают, заливают 1дм3дистил
лированной воды и кипятят в течение 1,5 — 2 ч. Отвар профильтровывают, доводятдо 1дм3дистилли
рованной водой.
Добавляют на 1дм3раствора:
хлористого натрия — 5.0 г;
пептона — 10,0 г.
Спомощью 10%-ногорастворагидроокиси натрияустанавливаютpH (8.15
1
0.05). Кипятят 10 мин.
Стерилизуютпри температуре(121 1 3)°С втечение (15
1
1)мин или притемпературе(112
±
5)вСв тече
ние (30
1
1) мин. На следующий день печеночный бульон сливают, освободив от осадка, доливают
дистиллированной водойдо 1 дм3. Вносятна 1дм3бульона: глюкозы — 5.0 г. агара — 0,8 г. цистеина —
0.3 г. Кипятят 10 мин, доводяткислотностьдо (7.7
1
0.1). Разливают в пробирки по 10 см3истерилизуют
при температуре (121 13) °С в течение (15 i 1) мин или при температуре (11215) °С в течение
(20
1
1)мин.
Среду проверяютна стерильность путем выдержки при температуре (3711) °С в течение 2сут.
Срок хранения среды при температуре (2012) °С — не более 1 мес, при температуре
(4
1
2) °С — не более 2 мес.
Ростовые качества каждой серии среды Блаурокка контролируют высевом лиофилизированной
1
биомассы бифидобактерий, при этом рост бифидобактерий должен проявиться не позднее чем через
48 чпри температуре (37 ♦1)°С.
6.3.2 Приготовление агаризованной кукурузно-лактозной среды
Внебольшомобъемедистиллированнойводы расплавляютагар-агарвколичестве2,5 г израсчета
на 1дм3приготовляемой среды. Костальному количествудистиллированной воды добавляют 10 гпеп
тона. 40 см3водного раствора кукурузного экстракта, разбавленного в соотношении 1 : 2, 6.6 г натрия
лимоннокислого трехзамещенного, 0,12 г магния сернокислого. 2 г калия фосфорнокислого двузаме-
щенного. Смесь нагреваютдо температуры (80
1
2) °С. после чегосоединяютс расплавленным агаром,
добавляют 10г лактозы и 0,15 г цистеина солянокислого или 0.5 г аскорбиновой кислоты. Цистеин пред
варительнорастворяютв небольшом количестведистиллированной воды, в которойустанавливают pH
(8.45
1
0.05)с помощью 10 %-ного раствора натрия гидроксида и нагревают на водяной банедо полного
растворения. Всю смесь доливают горячей дистиллированной водой до 1 дм3 и устанавливают pH
(7.05
1
0,05)с помощью 40 %-ного раствора натрия гидроксида.
Средуразливаютвпробиркипо 10или 20 см3истерилизуютпри температуре (112 ♦5)°С в течение
(30 1)мин.
6.4 Приготовлениепитательныхсреддлякультивированиямолочнокислых
стрептококков Streptococcus diacetilactis и Streptococcus thermophiius
6.4.1 Приготовление питательной среды М17
6.4.1.1 Основная среда: пептон 2.0—2.5 г. перевар сои — 5,0 г,дрожжевой экстракт — 2.5 г. мяс
ной экстракт — 5,0 г. глицерофосфат (C3HrOGPNa2) — 19.0 г, сернокислый магний (MgSO^ • 7Н ,0)—
0.25 г. аскорбиновая кислота — 0.5 г,агар-агар — 9—18 г.дистиллированная вода — 950.0 см3.
6.4.1.2 Раствор лактозы: лактоза — 10.0 г. дистиллированная вода — 100.0 см3.
Л
актозу раство
ряют в воде, стерилизуют при (121
1
1) "С в течение 15 мин.
6.4.1.3 Полная среда: основная среда — 95 см3, раствор лактозы — 5 см3. Непосредственно
перед использованием расплавляют основную среду в водяной бане и охлаждают до 48 °С—50 °С.
Подогревают растворлактозы до 48 ВС—50 °С. Добавляют растворлактозы косновной среде и переме
шивают.
Все компонентырастворяютвкипящейводе. Охлаждаютдо температуры 50°С. УстанавливаютpH
таким образом, чтобы после стерилизации pH был в пределах 7.1—7.2. Готовую среду разливают во
флаконы, стерилизуют при (121
1
1)еС втечение 15 мин.
5