ГОСТ 31928—2013
6.9.3 Среду Сабуро готовят по ГОСТ 10444.12.
На 1 дм3дистиллированной воды — Ю.Ог пептона. 18,0 г агар-агара. Нагреваютдо расплавления
агара, добавляют40.0г глюкозы. pH5.8. стерилизуютпри избыточномдавлении0.5атм при температуре
116 °С в течение 30 мин.
6.9.4 Средыдля определения псевдокаталазы готовятпо ГОСТ 10444.11.
6.10 Приготовленные питательныесредыдолжны иметьмаркировкусуказанием названиясреды,
даты изготовления и (или)даты истечения срока годности.
6.11 Для проведения испытанийдопускается использоватьготовые питательные среды промыш
ленногоотечественного иимпортногопроизводствав соответствиис инструкциями поихприменению, а
также оригинальные питательные среды, разработанные организацией — производителем лекар
ственных средств (микробиологических кормовыхдобавок, молочныхсывороток).
6.12 Приготовленные питательные среды хранят в течение срока годности в холодильнике при
температуре от 0 °С до 10 °С. Подсохшие питательные среды не используют. Перед использованием
температуру питательной среды доводятдо комнатной.
7 Подготовка питательных сред перед использованием
7.1 Питательные среды расплавляют на кипящей водяной бане или другим способом, который
дает аналогичный результат (например, текучим паром в автоклаве). Избегают перегрева среды и уда
ляют ее сразуже после расплавления. Перед использованием питательную среду содержат в расплав
ленном состоянии на водяной бане с терморегулятором при температуре (47 i 2) °С.
Сохраняют расплавленную питательную среду не более 8 ч. Не использованную до конца среду
после ее затвердения неприменяют.
7.2 При необходимостидеаэрирования питательныхсреднепосредственно передиспользовани
ем их прогревают в течение 15 мин на кипящей водянойбане.
7.3 Агаризованные питательные среды разливают в чашки Петри с толщиной слоя питательной
среды неменее2 мм (например, длячашекдиаметром 90ммобычнотребуется 12см3агаровойсреды)и
после застывания подсушивают. При подсушивании для удаления влаги с поверхности среды чашки
переворачиваютвверхдном и выдерживаютвтечение 30 минпри температуре48 °С—50 °С илив лами
нарном боксе в течение 1—2 ч. или в других условиях, обеспечивающих испарение конденсационной
влаги иисключающихмикробноезагрязнение. Приготовленныетакимобразом чашки Петри используют
немедленноили хранятпри условиях, предупреждающих изменение ихсостава, т. е. в темноте и в холо
дильнике. не более одной недели. Этот срок может бытьудлинен или сокращен согласно требованиям,
установленным стандартом на конкретный методиспытания.
8 Методы посева на питательные среды
8.1 Поверхностный метод посева на плотные среды
8.1.1 На подсушенную питательную среду, подготовленную по 7.3. наносят жидкий препарат или
разведениенавескии немедленноравномерно растирают поповерхностис помощьюстерильногостек
лянного или пластикового шпателя. Посев проводят параллельно вдве чашки Петри.
8.1.2 Засеянную поверхность подсушивают, выдерживая чашки в горизонтальном положении в
течение 15мин. и помещают втермостат, установленный насоответствующуютемпературу (кромеосо
бо оговоренных случаев). Если наблюдается чрезмерное обезвоживание среды (например, при 55 °С
или вследствие интенсивной циркуляции воздуха), чашки перед термостатированием неплотноуклады
ваютв пластиковыйпакет илианалогичноеприспособлениестемжеэффектом. В периодтермостатиро-
вания допускаются кратковременные колебания температуры, например во время таких обычных
операций, как загрузка или разгрузкатермостата.
8.1.3 Впосевах на агариэованных средахдля определения присутствия или подсчета количества
молочнокислых микроорганизмов, бактерий рода Lactobacillus. Pediococcus стрептококков группы N
рода Streptococcus. S.thermophilus ограничение доступа кислорода осуществляют методом, изложен
ным в ГОСТ 30425. или одним из указанных ниже способов:
- на застывшуюпитательную среду вчашках Петри наливаютвторой слой расплавленной иохлаж
деннойдо (45
±
1)вС агаризованнойсреды в количестве 5.0 см3и оставляютдо затвердения;
- чашки Петри помещаютвгазовую среду, состоящую из 95% газообразногоазота и 5 % углекисло
го газа;
8