ГОСТ 31928—2013
6.4.2 Приготовление среды Lee
6.4.2.1 Основа среды
В мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 10.0 гпептона. 50 см3дрожжевого экстракта. 5,0 г
лактозы. 3.0 г углекислого кальция, простерилизованного 0.5 г двухзамещенного фосфата натрия
(Na2HP04), 18 гагара,доливаютдистиллированной водой дометки, растворяют компоненты нагревани
ем на водяной бане и устанавливают pH таким образом, чтобы после стерилизации он составлял (7.0
±
1) при температуре 25 °С. Среду стерилизуют в автоклаве при температуре (121
±
1) °Св течение 20 мин
ипри необходимости хранят при температуре (4 i 1)°С не более 30 сут.
6.4.2.2 Для приготовленияпитательнойсреды к 10см3основыдобавляют20см3стерильного рас
творабромкрезолового пурпурногомассовой концентрацией 1г/дм3, перемешиваютиразливаютвчаш
ки Петри.
Срок хранения среды при температуре(4 i 1)°С — неболее 7сут.
6.5 Приготовлениепитательныхсреддлякультивированиябактерийрода
Propionibacterium
6.5.1 Плотную кукурузно-лактозную среду готовят по6.3.2.
6.5.2 Приготовление гидролизатно-молочной среды
Состав: агар — 2.5 г; неомицин — 17.0 г; пептон — 20,0 г, натрий хлористый — 3.5 г, лактоза —
10,0п цистеин солянокислый — 0.15г; гидролизованное молоко — 500см3;вода — 500см3.
Гидролизованное молоко готовят по ГОСТ 10444.1. затем разводятего водой в соотношении 1:1.
В небольшом количестве разведенного гидролизата расплавляют агар (в случае приготовления
селективнойсредыснеомициномвносят 17г неомицинана 1дм3).Костальномуколичествугидролизата
добавляютпептони хлористыйнатрий, смесьнагреваютдотемпературы (80
±
2) еС,послечегосоединя
ютс расплавленным агаром. Всмеси устанавливают pH (7.4 i 0.1). кипятят в течение (15 1 1)мин.дают
отстояться, сливают с осадка, не фильтруя, доливают горячей дистиллированной водой до заданного
объема идобавляют в неелактозу исолянокислый цистеин. Средуразливаютв пробирки высоким стол
биком по 10 см3и стерилизуют при температуре (112 z 1) °С в течение (30
±
1) мин с предварительным
подогревом автоклава паром в течение (30
±
1) мин. pH готовой среды — (7,1
±
0.1).
6.5.3 Сывороточно-дрожжевая среда
Дрожжевой экстракт — 1 г или 100 см3, молочная сыворотка — 5 г или 500 см3, водопроводная
вода — до 1000 см3. (NH4)2S04 — 0.2 %, NaCI — 0,5 %, CaCI2— 0.004 %. После стерилизации pH—6.5.
6.5.4 Среда для пропионовокислых бактерий
Л
актат натрия 1 % (или 10 %-ной молочной кислоты 5 см3на 1000 см3. pH 6.9. нейтрализуется
NaOH),дрожжевого автолизата 1%, пептона2 %, NaCI 0.5 %. агара 1.5 %. pH 6.9. Стерилизуютподдавле
нием. На чашкудобавляют 0.5 см35 %-ного раствора сульфата натрия.
6.6 Приготовление питательных среддля культивирования бактерий рода Pediococcus
6.6.1 Среду Бригс в модификации Шарп готовят поГОСТ 10444.11.
В 875см3дистиллированной воды вносят 15 г пептона. 20 г глюкозы. 25 см3дрожжевого экстракта,
5 гуксуснокислого натрия. 5 г калия фосфорнокислого однозамещенного, 2 г аммония лимоннокислого,
100 см3томатного сока.
6.6.2 Агар Хоттингерадля ветеринарныхцелей подокументу, действующему на территории госу
дарства. принявшего стандарт.
6.7 Приготовление питательных среддля культивирования бактерий рода Bacillus
6.7.1 Мясо-пептонный агар готовят по ГОСТ 10444.1.
6.7.2 Приготовление среды Гаузе
Бульон Хоттингера по ГОСТ 10444.1 с содержанием аминного азота 700 мг—30 см3, пептон
сухой — 5 г. натрий хлористый — 5 г. глюкоза — 10 г. агар микробиологический — 30 г. вода дистилли
рованная — до 1000см3.
Питательную среду разливают вколбы истерилизуют текучим паром в течение 30 мин.
6.8 Приготовление питательных сред для культивирования энтерококков Streptococcus
faecalis и Streptococcus faecium
6.8.1 Приготовление селективного агара по Сланецу и Бертли
20.0г пептона. 25.0см3дрожжевогоэкстракта. 2.0 г глюкозы. 4.0 г калияфосфорнокислогодвузаме-
щенного, (15,0 13.0) г агара помещают в мерную колбу вместимостью 1000 см3,доливаютдистиллиро
ванной водой до метки, нагревают до растворения компонентов. Охлаждают, устанавливают pH таким
образом, чтобы после стерилизации он составлял при температуре 25 еС (7.2
1
0.1). Стерилизуют теку
чим паром при температуре 100 °С в течение 30 мин. охлаждают до 50 °С. Добавляют 4.0 см3 раствора
6