ГОСТ ISO 11737-2—2011
После выделения микроорганизмов из единицы продукции или ЧПИ можно проводить испытания на стериль
ность с помощью мембранной фильтрации или культивирования всей смывной жидкости.
А.5.3.2 Мембранная фильтрация
При испытаниях на стерильность с помощью мембранной фильтрации смывная жидкость проходит через
стерильный мембранный фильтр, обычно с размерами пор 0.45 мкм, под действием вакуума или давления.
Поверхности, которые находились а контакте со смывной жидкостью, споласкиваются дополнительной сте
рильной смывной жидкостью или раствором, содержащим нейтрализатор, и смывной раствор пропускается через
мембранный фильтр (А.6.2.3). После этого:
a) питательная среда асептически переносится на фильтр либо
b
) фильтр асептически переносится 8 питательную среду.
Обе эти операции завершаются инкубацией.
А.5.3.3 Культивирование смывной жидкости
При испытаниях на стерильность методом культивирования смывной жидкости один подход заключается в
использовании питательной среды в качестве смывной жидкости, при этом после смыва питательная среда пере
мещается в стерильные контейнеры на инкубацию.
Альтернативный подход заключается в том. что может быть выбрана смывная жидкость, не поддерживаю
щая рост микроорганизмов, которая после смыва смешивается в равных объемах с питательной средой двойной
концентрации в стерильных контейнерах и затем выдерживается в инкубаторе.
А.5.4 Выбор условий культивирования
А.5.4.1 Международный стандарт по валидации и текущему контролю конкретного процесса стерилизации
может содержать рекомендации по условиям культивирования, используемым для испытания на стерильность.
А.5.4.2 Обычно при культивировании используют единую питательную среду с учетом предположения, что
она является оптимальной для культивирования аэробных и факультативных микроорганизмов, которые могут вы
жить под воздействием стерилизующего агента. При использовании соево-казеиноаой питательной среды в качес
тве единой среды для аэробных и факультативных микроорганизмов культивирование обычно проводится при
температуре (30 ± 2) ЬС в течение 14сут.Длядругих сред следует рассмотреть идругие режимы культивирования.
П р и м е ч а н и е — Температура культивирования, рекомендуемая для испытаний на стерильность, может
быть ниже рекомендуемой для оценки бионагрузки. Использование более низкой температуры помогает выявить
поврежденные или ослабленные микроорганизмы.
А.5.4.3 Условия культивирования выбирают в следующих случаях:
a) соответствующий международный стандарт по валидации и текущему контролю конкретного процесса
стерилизации не оговаривает используемую питательную среду;
b
) использование единых условий культивирования неприемлемо из-за вероятного наличия микроорганиз
мов других типов, устойчивых к воздействию стерилизующего агента (например, вероятного присутствия анаэроб
ных микроорганизмов).
А.5.4.4 При выборе условий культивирования для приведенных здесь примеров необходимо учитывать сле
дующие факторы:
a) природу продукции;
b
) способ производства:
c) источник потенциальной микробиологической контаминации,
d) вероятные типы встречающихся микроорганизмов.
Данные по типам микроорганизмов, полученные при определении бионагрузки а соответствии с ISO 11737-1,
могут помочь при выборе условий культивирования.
А.5.4.5 Применяемые обычно условия культивирования приведены в таблице А.2.
Т а б л и ц а А.2 — Условия культивирования
Типы микроорганизмов
Обычно применяемые питательные среды
Температура инкубации. *СЧ
Аэробные
Питательный бульон
Сердечно-мозговой бульон
Соево-казеиновый бульон
28—32
28—32
28—32
Грибы
Декстрозовый бульон Сабуро
Картофельно-декстрозовый бульон
Глюкозо-пептонный бульон
20—25
20—25
20—25
Факультативные
Жидкая тиогликолееая среда
Мясной бульон с глюкозой
28—32
28—32
" Могут использоваться другие температуры инкубации (примечание к А.5.4.2).
8