ГОСТ 31681—2012
Лимонная кислота моногидрат пищевая ч. по ГОСТ 908.
Кислота серная х. ч. по ГОСТ 4204.
Калия дигидроортофосфат ч. д. а.
Спирт этиловый технический (гидролизный) по ГОСТ 17299 или спирт этиловый ректификованный
технический по ГОСТ 18300.
Допускается применение других средств измерений и вспомогательного оборудования с метроло
гическими и техническими характеристиками и реактивов, по качеству не ниже указанных.
8.3Приготовление растворов
8.3.1 Раствор Кареза I
3,6г калия железосинеродистого (K4[Fe(CN)fi] ЗН20) растворяют в мерной колбе вместимостью
100 см3в 70—80 см3дистиллированной воды, объем раствора доводят до метки.
8.3.2 Раствор Кареза II
7.2 г цинка сернокислого 7-водного (ZnS04-7H20) растворяют в мерной колбе вместимостью
100 см3в 70—80 см3дистиллированной воды, объем раствора доводят до метки.
8.3.3 Раствор серной кислоты с концентрацией с (H2S04) = 4 моль/дм3(8 н)
В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 400—500 см3дистиллированной воды, мед
ленно и осторожно при перемешивании приливают 106.5 см3 концентрированной серной кислоты с
плотностью 1.84 г/см3. Объем раствора доводят до метки дистиллированной водой и перемешивают.
8.3.4 Раствор гидроокиси натрия с концентрацией с (NaOH) = 0.1 моль/дм3(0,1 н)
В мерную колбу вместимостью 1000 см3помещают 400—500 см3дистиллированной воды, осто
рожно при перемешивании добавляют 4,0 г гидроокиси натрия. Объем раствора доводят до метки дис
тиллированной водой и перемешивают.
8.3.5 Цитратный буфер
3.4 г натрия лимоннокислого трехзамещенного 5.5-водного пищевого (цитрата натрия)
(C6HsO;Na3 •5.5Н20)
и
0.042 г моногидрата лимонной кислоты (СеН80 7•Н20) растворяют в 30 см3дис
тиллированной воды в мерной колбе вместимостью 50 см3. Доводят pH раствора до 6.6. Для этого ис
пользуют в зависимости от pH полученного раствора раствор серной кислоты с концентрацией с
(H2S04) = 4 моль/дм3 или раствор гидроокиси натрия с концентрацией с (NaOH) = 0.1 моль/дм3.Объем
полученного растворадоводятдистиллированной водой до метки. Полученный раствор устойчив в тече
ние трех мес. при температуре 4 вС.
8.3.6 Раствор аммония сернокислого с концентрацией с (NH4)2S04= 2.2 моль/дм3(2.2 М)
29.1г аммония сернокислого ((NH4)2S04) растворяют в мерной колбе вместимостью 100 см3 в
60—70 см3 дистиллированной воды, объем раствора доводят до метки.
8.3.7 Раствор 1
Навеску никотинамидаденин-динуклеотидфосфат натриевой соли (НАД) массой 0,035 г растворя
ют в 7 см3цитратного буфера. Полученный раствор устойчив в течение трех недель при температуре
4 °С.
8.3.8 Суспензия 2
Навеску сухого лиофилизатаfi-галактозидазы массой 0.005 г суспендируют в 1см3раствора аммо
ния сернокислого с концентрацией с (NH4)2S04= 2,2 моль/дм3. Суспензия устойчива в течение 12 мес.
при температуре 4 °С.
8.3.9 Раствор 3
Навеску калия дигидроортофосфата (К4Р2Ог) массой 8.3 г растворяют в 40 см3дистиллированной
воды. Доводят pH раствора до 8.6 раствором серной кислоты с концентрацией с (H2S04) = 4 моль/дм3.
Полученный раствор устойчив в течение двух мес. при температуре 4 ®С.
8.3.10 Суспензия 4
Навеску сухого лиофилизата p-галактозодегидрогеназы массой 0.005 г суспендируют в 1 см3рас
твора аммония сернокислого с концентрацией с (NH4)2S04= 2.2 моль/дм3. Суспензия устойчива в тече
ние 12 мес. при температуре 4 °С.
Допускается применение набора реактивов для ферментативного анализа лактозы.
8.4 Проведение измерений
Рассчитывают навеску образца так. чтобы ожидаемая массовая концентрация лактозы составля
ла от 0,05 до 1.00 г/дм3.
Навеску образца массой 0.2—0,5 г количественно переносят в мерную колбу вместимостью
100 см3.
6