ГОСТР ИСО 20541—2011
Испытательный образец охлаждаютдо комнатной температуры (см. 9.1.1.9.1.2 или 9.1.3). Регули
руют значение pH до 8.0
±
0,1. Суспензию переносят количественно в мерную колбу вместимостью
100 см3содной меткой (6.4). Разбавляютдо метки водой итщательно перемешивают.
Промывают коническую мембрану (6.21)4 см3раствора хлорида натрия (5.2) и затем4 см3воды.
Переносят аликвоту на очищенную коническую мембрану и помещают мембрану в центрифугу
(6.9). Центрифугируют при центробежном ускорении 3000
д
при20 5Св течение 20 мин.
П р и м е ч а н и я
1 Комические мембраны для использования в центрифуге коммерчески доступны, например весьма подхо
дящим продуктом является концентратор размером 4 им Х/йгазрт^сполиэфирсульфоновой мембраной иотсечкой
по молекулярной массе 5000 Да.
2 Нет необходимости фильтровать всю суспензию через комическую мембрану. Можно использовать для
предварительного фильтрования 5-мкм мембранные фильтры (6.11), чтобы избежать закупоривания мембраны и
ускорить процесс фильтрования.
9.3 Холостое испытание с использованием реактивов
Параллельно с проведениемопределения (см. 9.4)проводятхолостое испытаниесиспользовани
ем реактивов. Раствор реактивовдля холостого испытания готовят по9.1 и 9.2, но заменяя испытатель
ный образец в 9.1 равным объемом воды.
9.4 Определение
Используя спектрометр (6.13)при длине волны 540 нм или Нд 546 нм и полумикронныеоптические
юоеоты (6.14). проводятопределение содержания при температуре от20 *С до 25 °С.
Перед переносом раствора пробы или холостого раствора реактива промывают пипетку раство
ром пробы или холостым раствором реактива соответственно.
Для отбора растворов реактивов можно использовать поршневые пипетки. Для отбора пробы и
холостых растворов реактивов используется тип градуированных пипеток, применяемых в испытаниях
ферментов (6.6).
Дляопределениянитратовинитритов(общиенитриты)выполняютпроцедурусогласнотаблице!
Т а б л и ц е 1 — Процедура для определения нитратов и нитритов (общие нитриты)
Процедура
Холостой раствор реактива.
см3
Раствор испытательного
образца, см3
Пипеткой вводят в оптическую кювету:
раствор испытательного образца (см. 9.2.1 или 9.2.2)
холостой раствор реактива (см. 9.3)
раствор NADPH/FAD (5.8)
раствор нитратредуктазы (5.9)
___
0.500
0.500
—
0.250
0,250
0.020
0.020
раствор цветного реактива I (5.10.1)
Перемешивают, например, шпателем или посредством круговых движений после герметического закрыва-
ния кюветы*, инкубируют 30 мин при комнатной темлерату|зе. затем добавляют:
0.2500,250
раствор цветного реактива II (5.10.2)
0.2500,250
* Для герметического закрывания оптической кюветы можно использовать, например. Parafilm2>.
П р и м е ч а н и е — Перемешивают, например, шпателем или посредством круговых движений после гер
метического закрывания кюветы. Оставляют кювету в темноте при комнатной температуре на 15 мин.
Считывают оптическую плотность А, иА|Пнп»« относительно воздуха (без прохождения эталонного пучка
через кювету) или относительно воды. Если значение оптической плотности не превышает 1.7, разбавляют рас
твор пробы и учитывают коэффициент разбавления при вычислении результата.
11 Vlvasp*>© — название подходящего продукта, имеющегося в продаже. Эта информация приведена только
для удобства пользователя настоящего стандарта.
2’ ParafUm® — название подходящего продукта, имеющегося в продаже. Эта информация приведена только
для удобства пользователя настоящего стандарта.
6