ГОСТ Р 52814— 2007
Если масса пробы иная, чем 25 г,используют необходимое количество неселективной среды, исходя
из соотношения 1:10.
Для уменьшения объема работы, когда испытывают больше одной пробы от определенного
продукта и когда очевидно, что объединенная навеска не влияет на результат испытания. — навески объе
диняют.
Пример. Если необходимо исследовать 10 навесок по 25 г, их объединяют и к 250 г добавляют
2.25 дм3неселективной среды.
8.1.2 Специфичность приготовления исходной суспензии для некоторых продуктов
Указанная специфичность приготовления можетбыть применена толькодля выявления бактерий рода
Salmonella.
8.1.2.1 Какао и какаосодержащие продукты (массовая доля какао более 20 %)
Добавляют в забуференную пептонную воду (см. 5.2.1) 50 г некислого казеина или 100 г/дм3обезжи
ренного молочного порошка и, если пищевые продукты предположительно содержат большое количество
грамположительных микроорганизмов, прибавляют после 2 ч инкубирования 0,018 г/дм3бриллиантового
зеленого (3.6 см3/дм3 раствора, приготовленного по В.4.4). Казеин и молочный порошок добавляют при
приготовлении забуференной пептонной воды до стерилизации.
8.1.2.2 Кислые и кислотосодержащие пищевые продукты
При неселективном обогащении должна быть гарантия того, что pH не будет ниже 4,5.
pH кислых и кислотосодержащих продуктов стабилизируют путем использования забуференной пел-
тонной воды двойной концентрации.
Допускаетсятакжепри высеве жидких высококислотных продуктов для предотвращения сниже
ния pH сред на 0.5 и более pH продукта перед посевом доводить до (7.0 ± 0.2).
При высовв твердых высококислотных продуктов доводят pH до (7.0 ±0.2) в посевах.
Доведение pH проводят с соблюдением правил асептики с помощью стерильных растворов гид
роокиси натрия и соляной кислоты, приготовленныхпо ГОСТР10444.1. Количество добавляемыхра
створов устанавливают опытным путем.
8.2Носелективное обогащение
Инкубируют исходную суспензию (см. 8.1.1) при температуре (37 ± 1) °С в течение (18 ± 2) ч.
8.3 Селективноо обогащение
Культуры, полученные после инкубирования по 8.2, пересевают в среды для селективного обога
щения. Для этого по 1см3культуры пересевают в 10 см3 RVS-бульона ив 10 см3селенитовой среды или в
10 см3тетратионатного бульона Мюллер-Кауфмана.
Посевы на RVS-бульоне инкубируют при температуре (41.5 ± 1,0) °С в течение (24 ± 3) ч (следят за
тем. чтобы температура непревышала 42.5 °С). а на тетратионатном бульоне и селенитовойсреде посевы
инкубируют при температуре (37 ± 1) еС в течение (24 ± 3) ч.
Если из одного пищевого продукта проведен высев нескольких навесок (каждой отдельно) для выяв
ления бактерий рода Salmonella, то допускается из каждого посева по 8.2 пересев проводить в один фла кон
скаждой селективной питательной средой (RVS-бульоном, тетратионатным бульоном Мюллер-Кауфма на.
селенитовойсредой). При этом количество селективной среды во флаконедолжно быть увеличено по
сравнению с 10 см3во столько раз. из скольких посевов проводят пересев.
Свежие продукты, не содержащие поврежденныхмикроорганизмов, подвергнутые каким-либо воз
действиям. например сушке, заморозке и другим, допускается высевать непосредственно в селектив
ные среды, минуя этап неселективного обогащения. Соотношение между количеством высеваемого
продукта и средой должно быть но менее 1:10.
8.4 Пересев на чашки и идентификация
8.4.1 Культуры через 24 ч инкубирования на селективных средах пересевают по ГОСТ 26670 так.
чтобы получить хорошо изолированные колонии, на XLD-arap и на одну из агаризованных сред. висмут-
сульфит агар, средуПлоскирева, среду Эндо, средуЛевина или бриллиантовый зеленый агар.
При отсутствии больших чашек используют для посева петлей две средние чашки (одну за другой).
8.4.2 Чашки переворачивают (см. 8.4.1) вверх дном и помещают в термостат при температуре
(37 ± 1) °С.
8.4.3 После инкубирования в течение (24 ♦ 3) ч, а на бриллиантовом зеленом агаре — 48 ч, просмат
ривают чашки (см. 8.4.2) и отмечают присутствие типичных колоний бактерий рода Salmonella и не совсем
типичных колоний, которые могут быть бактериями рода Salmonella. Отмечают их местоположение надне
чашки.
1375