ГОСТ Р 52814— 2007
Посевы инкубируют при температуре (37 ± 1) °С в течение (24 ± 3) ч.
После инкубации прибавляютдве капли раствора креатина, три капли спиртового раствора 1-нафтола
идее капли раствора гидроокиси калия, перемешивают содержимое пробирки после прибавления каждого
реактива.
Появление через 15 мин от розовогодо светло-красногоокрашивания указывает на положительную
реакцию.
Бактерии рода Salmonella не образуют ацетоина (реакция Фогес-Проскауера отрицательная).
Допускается определение ацетоина проводить без применения раствора креатина. Для этого
после инкубирования к 1см1отобранной культуральной жидкости прибавляют 0.6 см3 раствора 1-
нафтола и 0.2см3раствора гидроокисикалия. Послеприбавлениякаждогореактива пробиркувстря
хивают. Появлениерозового окрашивания через 15 мин указывает на положительную реакцию.
8.5.3.7 Определение образования индола (см. 5.2.15)
Культуры пересевают в пробирку, содержащую 5 см3триптон/триптофановой среды, или в бульон
Хоггингера. или вмясо-поптонный бульон с L-триптофаноы. Посевы инкубируютпри температуре (37± 1) "С в
течение(24 ± 3)ч.
После инкубирования к посевам прибавляют по каплям 1 см3реактива Эрлиха или Ковача, содержи
мое пробирки перемешивают.
Образование красного кольца указывает на положительную реакцию. Желто-коричневое кольцо ука
зывает на отрицательную реакцию.
Бактерии рода Salmonella не образуют индол.
8.5.3.8 Определение ферментации маннита и сахарозы
Культуры пересевают в среды Гиссас маннитом или сахарозой. Посевы инкубируют при темпе
ратуре (37 ±1)°Св течение (24 ± 3) ч.
Бактериирода Salmonella не ферментируют сахарозу, но ферментируют маннит. При сбражива
нии маннита цвет среды изменяется, образуется или не образуется газ.
8.5.3.9 Определение подвижности
Культуры пересевают уколом в полужидкий питательный агар или полужидкиймясо-лептонный
агар.
Посевы инкубируют при температуре (37 ± 1 )еС в течение (24 ± 3) ч.
При росте подвижных культур отмечается диффузионный рост по всему столбику агара, при
ростенеподвижных культур — вокруг места укола.
Бактерии рода Salmonella подвижны, кроме S. даШпагит и S. риНогит.
8.5.3.10 Интерпретация биохимических тестов приведена в таблице А.1 (приложение А).
8.5.4 Серологическая идентификация
8.5.4.1 Общие положения
Определение присутствия соматического О-антигена. антигена вирулентности Vi-, жгутикового Н-ан-
тигена в изолированных колониях (см. 8.5.2) проводят с помощью реакции агглютинации на предметном
стекле с соответствующими сыворотками после исключения самоагглютинирующих штаммов. Сыворотки
используют в соответствии с инструкцией изготовителя, если естьотличие от описания, приведенного ниже.
Серологическую идентификацию для подтверждения принадлежности к бактериям рода Salmonella
проводят с культурами, предварительно пересеянными на поверхность мясо-пептонного агара или
ГРМ-агара.
8.5.4.2 Исключение самоагглютинирующих штаммов
Помещают каплю физиологического раствора на тщательно очищенное предметное стекло. Диспер
гируют вэтой капле часть тестируемой колонии так, чтобы получилась гомогенная и густая суспензия.
Допускается размешивание части колонии в капле воды и перемешивание этого раствора с одной
каплей физиологического раствора.
Покачивают осторожно стекло в течение 30—60 с. Отмечают результаты на темном фоне, лучше с
помощью увеличительного стекла. Если наблюдается вразной степени склеивание бактерий, то есть обра
зование осадка, то считают, что тестируемые штаммы обладают самоагглютинацией.
Штаммы бактерий, обладающие самоагглютинацией. не подвергаютдальнейшей серологической иден
тификации.
8.5.4.3 Определение наличия О-антигенов
Штаммы, у которых не выявлено самоагглютинации. испытывают в реакции агглютинации
с агглютинирующими адсорбированными поливалентными сальмонеллезными О-сыворотками основ
ных группА. В. С. D. Е. а затем, еслине выявлено О-антигенов с сыворотками основных групп,
ставят реакцию с сыворотками редких групп.
8
140