ГОСТ 20729—75 Стр. 9
Приготовление реактива Е
Реактив Е является реактивом Д. разведенным до I н. раство
ра. Например, если реактив Д является 2,3 н. раствором кисло
ты. то для приготовления I и. раствора Е надо брать 10 мл реак
тива Д и 13 мл дистиллированной воды.
Построение градуировочного графика для определения белка
Готовят ряд растворов с определенным содержанием белка
нисходящей концентрации от 0,1 до 0,01%, с которыми ставят
цветную реакцию по п. 3.8.3. Для приготовления растворов можно
использовать альбумин, миозин, нативную сыворотку. Содержа
ние белка в растворе определяют по Кьельдалю. Интенсивность
окраски измеряют на фотоэлектроколориметре .против воды. Из
оптической плотности растворов белка вычитают оптическую плот
ность контроля на реактивы и полученную величину откладывают
по оси ординат. По оси абсцисс откладывают концентрацию белка
в растворе (в процентах или в миллиграммах). Разведение иссле
дуемого образца для постановки цветной реакции выбирают такое,
чтобы основное количество замеров по величине оптической плот
ности лежало в пределах 0,2—0,8. где точность измерения наибо
лее высокая.
3.8.3. Проведение испытания
В пробирку наливают 1 мл разведенной (1 : 10) мясной воды,
добавляют 5 мл реактива С, перемешивают и через 10 мин добав
ляют 0,5 мл реактива Е. Одновременно ставят контроль на реак
тивы, для чего вместо мясной воды берут 1 мл дистиллированной
воды и добавляют те же реактивы, что и в пробирку с мясной во
дой. Смесь хорошо перемешивают и ставят в темное место на 30--
40 мин, интенсивность окраски измеряют на фогоэлектроколори-
метре с красным фильтром (630—640 нм) против воды в 5-милли
метровых кюветах. Из величины оптической плотности испытуемо
го образца вычитают величину оптической плотности контроля на
реактивы. По полученным значениям оптической плотности раст
воров с помощью градуировочного графика определяют содержа
ние белка в пробах. При расчете содержания белка в пробе учи
тывают кратность разведения перед цветной реакцией.
.За окончательный результат испытания принимают среднее
арифметическое результатов двух параллельных определений. До
пускаемые расхождения между результатами параллельных опре
делений не должны превышать ±0,05%.
3.9.О п р еде л е н и ск о н ц е н т р а ц и иводородных
ионов (pH)
3.9.1. Аппаратура и материалы.
Для проведения испытания применяют:
рН-метр;
стаканы лабораторные по ГОСТ 10394—63;