ГОСТ 23*58-81 С. 17
споровых форм рост будет наблюдаться как в прогретой пробир*.
ке. гак и в непрогретой.
Рост Cl. botulinum характеризуется газообразованием и помути
нением среды.
Для приготовления мазков пастеровской пипеткой берут куль
туру со дна пробирки. Мазкн окрашивают по Граму и микроско-
пируют. Возбудитель ботулизма имеет вид палочек с закруглен
ными концами различной длины и ширины в зависимости от типа*
часто — коротких цепочек. Клетки со спорой имеют вид ракетки,
отделившиеся споры —овальные. Клетки в молодомвозрасте
грамположнтельные. При старении культуры (через четверо и бо
лее суток) появляются грамотрнцательные палочки.
При наличии в мазках характерных палочек и спор для боту-
линуса проводят биологическую пробу. Для этого стерильной пи
петкой отсасывают культуральную жидкость так, чтобы вазели
новое масло осталось н пробирке. Культуральную жидкость цент
рифугируют с частотой вращения 3000 об/мин 1в течение 20 мин.
С полученной надосадочной жидкостью ставят биологическую про
бу на мышах.
Анализ на ботулиннческий токсин проводят следующим обра
зом. Вначале ставят реакцию нейтрализации со смесью противо-
ботулнннческих сывороток. Смешивают равные объемы монова
лентных сывороток типов А. В, С, Е. F и 0,6 см* полученной сме
си добавляют в пробирку к 2.4 см11 исследуемого центрифугата,
В другую (контрольную) пробирку к 2,4 см* исследуемого цент
рифугата добавляют 0,6 см3 физиологического раствора. Содер
жимое пробирок перемешивают и выдерживают в течение 30 мин
при 121±3)°С. Для биологической пробы анализируемый ценгри-
фугат вначале отбирают из контрольной, а затем из" опытной про
бирки по 1 см* и вводят двум белым мышам массой по 16—18 г
каждая.
Остаток центрифугата сохраняют в холодильнике для даль
нейших исследований.
Наблюдение за животными ведут на протяжении 2, 4, 6, 24 ч
в течение 4 суток.
При наличии ботулннического токсина две контрольные мы
ши, которым вводился не смешанный с сывороткой центрнфугат,
болеют, а иногда гибнут; у мышей, которым вводили смешанный
с сывороткой центрнфугат, признаков заболевания ботулизмом не
наблюдается.
Если в центрнфугате обнаружен ботулиннческий токсин, то
для определения типа токсина ставят развернутую реакцию ней
трализации с моновалентными типоспецнфнческнмн антитоксичес
кими диагностическими сыворотками.
Для этого в шесть пробирок разливают по 2,4 см3 фильтрата,
затем в пять пробирок добавляют по 0,6 см* сыворотки типов А,