ГОСТ Р ИСО 11138-1-2000
чтобы удалитьтест-микроорганизмы износителе. Определение числа выживших тест-микроорганизмов должно
быть проведено в специальных условиях культивирования по методам, установленным изготовителем.
В 5 Пользуясь полученными данными, строится кривая зависимости логарифма выжившей популяции
от времени в минутах или уровня лозы в линейном виде кривая регрессии, пользуясь методом наименьших
квадратов. Точки с данными выживаемое™ менее 0.5 логарифма начальной популяции нс должны включаться в
регрессионный анализ. Пс отрицательному наклону линии регрессии рассчитывается величина Dв минутах
или в единицах поглощенной лозы.
В6 Коэффициент регрессии линейности кривой выживания должен быть нс менее 0,8.
ПРИЛОЖЕНИЕ С
(обязательное)
Фракционный негативный анализ (метод MPN для последовательного определения величины D
с использованием ограниченного метода Спирмана-Карбера)
П р и м е ч а н и е —Фракционные негативные данные применяются для определешш влияния процесса
стерилизации на характеристики резистентности тесг-микроорганизмовс помощью метода наиболее вероятных
величин —MPN (Most Probable Number).
С.1 Контролируемые пробы должны быть подвергнуты кратным экспозициям в определенных условиях
воздействия всехпеременных факторов процесса стерилизации, исключая продолжительность или уровень дозы
воздействия, которые остаются постоянными. В каждой экспозиции должно быть не менее 20 повторностей
Каждый период экспозиции или уровень дозы должен отличаться от предыдущего на постоянный интервал. В
каждой экспозиции должно использоваться одно и то же количество повторностей.
П р и м е ч а н и е — Требования к работе испытательного оборудования приведены в ГОСТ Р
ИСО 11138-2 и ГОСТ Р ИСО 11138-3.
С.2 После 2 ч экспозиции каждый инокулированный носитель в асептических условиях помешается в
пробирку, содержащую адекватное количество соответствующей стерильной питательной среды. Обьем среды
должен быть одинаков для каждой повторности. Если питательная среда включена изготовителем в состав
биологического индикатора, то изготовитель должен приложить инструкции по культивированию, а также
вылать требования к питательной среде или указать на возможность сс приобретения и/’или привести
исчерпывающие данные для сс приготовления.
С.З Инокудировашше носители инкубируются при температуре, рекомендованной изготовителем. Куль
туры исследуются на рост тссг-микроорганиэмов по истечении времени инкубации, рекомендуемого изготови
телем. Рост тсст-микроорганнзма может быть установлен по мутности питательного бульона,
поверхностному росту на бульоне или осаждению на дне пробирки в зависимости от характеристик тест-
микроорганизма.
С.4 Результаты следует записывать в виде отношения инокулированных носителей с выжившими
тссг-микроорганизмами к общему числу инокулированных носителей, подвергнутых воздействию каждой
субл стальной экспозиции.
ПРИЛОЖЕНИЕ D
(обязательное)
Расчет величины
D
с использованием ограниченного метода Спирмана-Карбера
D.I Расчет величины
D
П р и м е ч а н и е —Ограниченный метод Спирмана-Карбера (Spearman-Karbcr) требует, чтобы последо
вательные экспозиции отличались друг от друга на постоянный интервал d и в каждой экспозиции использо
валось одно и то же число реплик (биологических индикаторов) я.
D.1.I Чтобы охватить фракционно-негативную область, нужно выбрать интервал экспозиции или уровня
доз (£/|, Ог, Uk). Начальная экспозициявыбирзстся так, чтобы стерилизующий эффект был равен нулю
8