ГОСТ Р ИСО 11138-1-2000
ПРИЛОЖЕНИЕ А
(обязательное)
Определение числа живых тест-микроорганизмов
Л. 1 Инокулированные носители должны бьггьисследованы на наличие выжившихтест-микроорганизмон
в соответствии с А.2 —А4 или альтернативным методом. При использовании альтернативного метода должно
быть известно соотношение рекомендуемого и альтернативного методов.
А.2 Следует использовать не менее четырех проб из каждой партии, серии или экспозиции. Каждая проба
должна быть помешена в вымывающую питательную среду соответствующего объема. Тсст-микроорганизмы
вымываются от инокулированных носителей с помощью принятой методики (например, встряхиванием со
стеклянными бусами, перемешиванием в гомогенизаторе, ультразвуковом или другим соответствующим
методом).
А.З Суспензия должна разбавляться в соответствующей стерильной разбавляющей жидкости так. чтобы
в дозах, предназначенных для посева в чашках, находилось от 30 до 300 колонисобразующнх единиц (КОЕ).
Указанные дозы стерильной жидкости должны быть либо перемешаны с расплавленным питательным атаром,
либо посеяны вчашки с твердой питательной средой. Изготовители биологических индикаторовдолжны
указать или обеспечить поставку соответствующей среды и/или привести полные данные для
приготовления такой
среды.
А 4 Помещенные в чашки пробы должны инкубироваться при температуре и в течение времени
установленных изготовителем.
П р и м е ч а н и я
1 Обычно температура и время инкубации составляют от 55 до 60 *С нс менее 48 ч для термофильных
организмов и от 30 до 37 *С нс менее 48 ч для мезофильных организмов.
2 Высыхание питательных сред при повышенных температурах инкубации может неблагоприятно влиять
на рост.
А.5 После соответствующего периода инкубации должно быть подсчитано количество колониеобразую
щих единиц в чашках и по ним вычислено среднее количество выживших тест-микроорганизмов.
ПРИЛОЖЕНИЕ В
(обязательное)
Метод кривой выживания
П р и м е ч а н и е — Идеальная кривая выживания является линейной во всем диапазоне инактивации.
На практике имеют место отклонения от этого идеала, однако линейность должна сохраняться в приемлемых
пределах. Построение кривой выживания методом прямого подсчета позволяет представить
резистентность популяции численностью более 5х I01, в то время как метод MPN (приложение С)
позволяет представить резистентность популяции численностью мснсс 5 х 10°. Хорошая корреляция между
величинами D, получен
ными
в
этими
с
двумя методами, позволяет утверждать, что серьезных отклонений от линейности кривой
выжи ания н наблюдается.
В.1 Исследуемые пробы подлежат обработке при ступенчатом возрастании экспозиции (выдержки) в
определенных условиях. Должен быть установлен диапазон изменения экспозиции Каждая экспозиция или
доза должны отличаться от предыдущей на постоянную величину.
П р и м е ч а н и е - Требования к характеристикам аппаратуры приведены в ГОСТ Р ИСО 11138-2 и
ГОСТ Р ИСО Ш 38-3.
В 2 Должны быть использованы нс мснсс пяти экспозиций, которые должны включать
a) одну экспозицию, в которой проба не подвергается воздействию стерилизующего атента (стерилизую
щий агент может отсутствовать или может быть заменен на газ. нс вызывающий легального действия);
b
) снижение популяции до 0,01 % исходного инокулята, по крайней мере, при одной экспозиции.
В.З В каждой экспозиции должно быть использовано не менее четырех инокулированных носителей в
каждом определении. При каждой экспозиции должно быть то же самое количество повторностей.
В.4 Отобранные пробы должны быть обработаны в течение 2 ч после завершения каждой экспозиции,
7