ГОСТ Р ИСО 22610—2022
мощью метода, описанного в приложении С. Должны быть сделаны записи, подтверждающие правиль
ность выполнения испытания.
6.2 Цилиндрическая нагрузка из нержавеющей стали или другого подходящего материала, при
годного для стерилизации, — примерно 9 см в диаметре и 4 см высотой.
6.3 Конические стальные кольца, общей массой (800 ± 1) г, — для фиксации конструкции из ис
пытуемых материалов (см. приложение В).
6.4 Динамометр, способный измерять силу, — (3,00 ± 0,05) Н.
7 Подготовка чашек с агаром
Для определения наличия бактериальной инфекции на поверхности донора (см. 9.7), проверки
концентрации инокулята (см. раздел 8) и контроля окружающей среды (см. 9.7) используют стандарт ные
чашки Петри диаметром 9 см. Для одного испытуемого образца подготавливают следующие чашки с
агаровой средой:
- пять чашек Петри диаметром 14 см на одно испытание (см. 9.2);
- одну чашку Петри диаметром 14 см для измерения расстояния от поверхности агара до краев
(см. 9.2.2).
Чашки с агаровой средой диаметром 14 см подготавливают на горизонтальной поверхности и за
полняют агаром с триптоном, глюкозой и белковым экстрактом (TGEA), приготовленным в соответствии с
требованиями приложения А, либо аналогичной средой, приготовленной в соответствии с требова
ниями производителя, так, чтобы расстояние между поверхностью среды после застывания и верхним
краем чашки диаметром 14 см составило (3,0 ± 0,5) мм.
П р и м е ч а н и е1 — Для чашек диаметром 9 см расстояние от поверхности агара до краев не должно со
ставлять (3,0 ± 0,5) мм. Можно использовать установленный в лаборатории соответствующий объем среды.
П р и м е ч а н и е2 — Если проводят более одного испытания, то проверку концентрации инокулята и из
мерение расстояния от поверхности агара до краев необходимо проводить только один раз, и, следовательно,
количество чашек Петри может быть соответственно уменьшено.
У разных поставщиков и/или в разных партиях высота чашек Петри может быть разная. Объем
или масса агара, которым каждая чашка будет заполнена до нужного расстояния от краев, должны быть
определены заранее путем измерения высоты и диаметра чашки.
Наливают определенное количество TGEA в подходящую стеклянную колбу и стерилизуют при
температуре (121 o’3) °С в течение 15 мин. При заполнении чашек Петри агаром применяют объемоме
трические или гравиметрические методы.
Колбы с TGEA можно хранить в холодильнике при температуре (5 ± 3) °С не более трех месяцев,
однако предпочтительнее использовать свежеприготовленный агар.
В случае использования несвежеприготовленного TGEA агар повторно разжижают путем нагре
вания колб в кипящей воде, микроволновой печи или любым другим подходящим способом. Избегают
перегрева и прекращают нагрев сразу после того, как среда станет жидкой.
Затем жидкий TGEA охлаждают примерно до температуры 45 °С и выливают в чашки Петри; сле
дят за тем, чтобы на поверхности не было пузырьков воздуха и неровностей. Поверхность затвердев
шего агара должна быть как можно более гладкой. Если есть сомнения, следует использовать свеже
приготовленный агар.
Каждую чашку оставляют высыхать без крышки при комнатной температуре в шкафу биобезопас
ности класса II в течение 20 мин. На поверхности агара не должно быть видимой жидкости (конденса та).
Чашки закрывают и хранят в шкафу биобезопасности или в чистой, асептической, закрытой пласти ковой
емкости, используют их в течение (24 ± 4) ч.
8 Бактериальный инокулюм
Подготовка бактериального инокулюма:
- за день до испытания 1 мл исходной суспензии Bacillus atrophaeus (АТСС 9372) 109 спор/мл, хра
нящейся в холодильнике, разбавляют 9 мл 96 %-ного этанола. Эту 10-кратно разведенную суспензию
хранят в холодильнике до следующего дня. Ее концентрацию проверяют путем определения количе
ства жизнеспособных микроорганизмов с использованием стандартных микробиологических методов,
5