ГОСТ Р ИСО 22610—2022
разведения суспензии в пептоновой воде и нанесении 100 мкл в чашки диаметром 9 см, содержащие
TGEA или аналогичную среду. Суспензия должна быть в достаточной степени разбавлена, чтобы обе
спечить точный подсчет колоний в конечной чашке.
Чашки инкубируют при температуре (37 ± 2) °С в течение 16— 24 ч, пока рост не станет достаточ
ным для точного подсчета, но колонии в чашке еще не будут сливаться.
Бактериальное контрольное заражение «/» определяют, по крайней мере, в трех параллельных
испытаниях доноров и выражают результат в количестве колоний/мл инокулята.
10 Оценка
10.1 Необходимые условия для валидированного исследования
- Коэффициент проницаемости бактерий во влажной среде [Р (%)] референтного материала дол
жен регулярно определяться и отражаться в документации в соответствии с системой менеджмента
качества, в которой обосновывают частоту испытаний.
- Коэффициент проницаемости бактерий во влажной среде [Р (%)] референтного материала дол
жен находиться в диапазоне от 0,64 % до 3,04 %.
- Требования к оборудованию:
- скорость вращения чашки с агаровой средой (60 ± 1) об/мин;
- рычаг управляется эксцентриковым кулачком, вращающимся со скоростью (5,6 ± 0,1) об/мин;
- стальной щуп, имеющий полированное окончание в виде полусферы радиусом 11 мм, явля
ется съемным;
- сила (3,00 ± 0,05) Н, оказываемая стальным щупом на материалы, регулируется скользящим
грузом.
- Расстояние от поверхности агара до краев составляет (3,0 ± 0,5) мм и определяется для каждой
партии чашек, заполняемых вместе.
- Концентрация инокулюма от 5,0 ■103 до 1,5 • 104 спор/мл.
- Максимальное поддающееся счету число колоний в чашке диаметром 14 см с агаровой средой
составляет 760 колоний.
- Если количество колоний в какой-либо из пяти чашек, используемых в испытании, не может
быть подсчитано, то коэффициент проникновения невозможно рассчитать.
- Если при испытании материала в чашках наблюдается чрезмерный рост колоний (>760), бакте
риальная нагрузка должна быть снижена до тех пор, пока число колоний не достигнет <760, но бакте
риальная нагрузка будет составлять не менее 5 000 спор/мл. Если в чашках по-прежнему наблюдается
чрезмерный рост колоний (>760), то этот метод испытания неприменим к данному материалу, поскольку
соотношение бактериального контрольного заражения и пропущенных материалом бактерий не сба
лансировано.
1 — Чрезмерный рост колоний в чашках может быть признаком низкой эффективности
П р и м е ч а н и е
защиты.
П р и м е ч а н и е
2 — Некорректные результаты испытания могут быть сообщены только для сведения.
Особенно целесообразно сообщать дополнительно сведения о причине, по которой результат испытания признан
некорректным.
10.2 Определение количества колоний
Bacillus atrophaeus
Количество колоний Bacillus atrophaeus подсчитывают в каждой чашке, задействованной в ис
пытании. Не учитывают область радиусом 15 мм вокруг центра чашки. Количество колоний в чашках, в
которых наблюдается чрезмерный рост и большое количество сливающихся колоний, не может быть
подсчитано, и такие чашки должны быть исключены из рассмотрения (см. 10.1). Подсчет может осу
ществляться визуально или с помощью автоматического счетчика колоний при условии, что установле на
корреляция между визуальным и автоматическим подсчетом.
11 Обработка результата
Процент проникновения Рп с точностью до трех знаков для каждого испытуемого образца вычис
ляют по формуле
11