ГОСТ 33645—2015
М Е Ж Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н Ы ЙС Т А Н Д А Р Т
МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ ХИМИЧЕСКОЙ ПРОДУКЦИИ,
ПРЕДСТАВ
Л
ЯЮЩЕЙ ОПАСНОСТЬ Д
Л
Я ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ
Оценка метаморфоза земноводных
Testing of chemicalsofenvironmental hazard.
The Amphibian MetamorphosisAssay
Дата введения — 2016—09—01
1 Область применения
Настоящий стандарт устанавливает процедуру оценки метаморфоза земноводных (ОМЗ).
2 Принцип метода
2.1 Оценка метаморфоза земноводных (ОМЗ) является скрининговым методом, предназначен
ным для эмпирического установления веществ, которые могут нарушать нормальную функцию гипо-
таламо-гипофизарно-тиреоидной (ТВД) оси. ОМЗ представляет собой обобщенную модель на позво
ночных. основанную на консервативных структурах и функции ТВД оси. Данный тест важен, поскольку
метаморфоз земноводных обеспечивает хорошо изученный, зависимый от щитовидной железы про
цесс. который реагирует на вещества, активные для оси ТВД. и это единственный существующий тест,
с помощью которого обнаруживается активность в отношении щитовидной железы у животных, подвер
гающихся морфологическому развитию.
2.2 Общий дизайн опыта включает воздействие на стадию 51 головастика Xenopus Laovis ми
нимум трех различных концентраций испытуемого вещества и воды для разведения, используемой в
качестве контроля, в течение 21 сут. Для каждой обработки в испытании должно быть четыре повтор
ности. В начале испытания количество личинок составляет 20 головастиков на испытуемый резервуар
для всех обрабатываемых групп. Конечными точками наблюдений являются длина задних конечностей,
длина от кончика морды до клоаки (SVL). стадия развития, сырая масса, гистология щитовидной желе
зы и ежедневные наблюдения по гибели.
3 Описание метода
3.1 Тестовые виды
Xenopus laevis обычно культивируют в лабораториях по всему миру, и их легко получить от ком
мерческих поставщиков. Размножение этого вида легко индуцируется в течение всего года иньекцией
человеческого хорионического гонадотропина (ХГЧ). и полученные личинки можно легко культивиро
вать до требуемой стадии развития в больших количествах, позволяющих проводить испытания кон
кретно на определенной стадии развития. Предпочтительно, чтобы личинки, используемые в тесте,
были получены из взрослых особей, культивированных внутри лаборатории. В качестве альтернативы,
хотя это не является предпочтительной процедурой, яйца или эмбрионы можно транспортировать в
лабораторию, в которой проводится испытание, и организмам дается возможность акклиматизации;
доставка на личиночной стадии для использования в испытании недопустима.
Издание официальное
1