ГОСТ 32635-2014
2.11 микроядра (Micronucloi): небольшие ядерные образования, отделенные от основного ядра
клетки, образовавшиеся во время телофазы митоза или мейоза в результате отставания
хромосомных фрагментов или целых хромосом.
2.12 митоз (Mitosis): деление клеточного ядра, обычно подразделяющееся на профазу,
прометафазу, метафазу, анафазу и телофазу.
2.13 митотический индекс (Mitotic index): отношение числа клеток в метафазе к общему числу
клеток в наблюдаемой клеточной популяции: показатель клеточной пролиферации в данной
популяции.
2.14 мутагенный (Mutagenic): образование наследуемых изменений последовательности пар
оснований в ДНК или структуры хромосом (хромосомные аберрации).
2.15 нерасхождение (Non-disjunction): нарушение расхождения парных хроматид и правильной
сегрегации при образовании дочерних клеток, приводящее к аномальному числу хромосомв
дочерних клетках.
2.16 относительное возрастание количества клеток (RICC) (Relative Increase in Cell Count
(RICC)): метод измерения цитотоксичности в методиках, при которых не используется ЦХВ (см.
формулы в Приложении А).
2.17 относительное удвоение популяции (RPD) (Relative Population Doubling (RPD)): метод
измерения цитотоксичности в методиках, при которых не используется ЦХВ (см. формулы в
Приложении А).
2.18 полиплоидия (Polyploidy): численные нарушения хромосом в клетках или организмах,
затрагивающие полный набор(ы) хромосом, в противоположность нарушениям по одной или
нескольким хромосомам (анеуллоидия).
2.19 пролиферативный индекс (PI) (Proliferation Index (PI)): метод измерения цитотоксичности
в методиках, при которых не используется ЦХВ (см. формулы в Приложении А).
2.20 центромера (Centromere): участок ДНК хромосомы, где две хроматиды соединяются
вместе и в котором оба кинетохора соединяются друг с другом.
2.21 цитокинез (Cytokinesis): процесс клеточного деления сразу после митоза, формирующий
дочерние клетки, каждая из которых содержит одно ядро.
2.22 цитостатичность (Cytostasis): ингибирование роста клеток (см. формулы в Приложении А).
2.23 цитотоксичность (Cytotoxicity): вредные эффекты на структуру или функцию клеток, в
конечном счете приводящие к гибели клетки.
3 Принцип исследования
Культуры клеток человеческого или животного происхождения обрабатывают исследуемым
веществом как без. так и в присутствии экзогенного источника метаболической активации за
исключением клеток с адекватными особенностями метаболизма. Во все тесты включают контроли с
растворителем/разбавителем и позитивные контроли.
Во время и после воздействия исследуемым веществом клетки должны расти такой период
времени, который достаточен для формирования из хромосомных нарушений и нарушений веретена
деления микроядер в интерфазных клетках. Для индукции анеуплоидии вещество должно обычно
присутствовать во время митоза. Микроядра анализируют в фиксированных и окрашенных
интерфазных клетках. Идеально, микроядра следует анализировать только в тех клетках, которые
закончили митоз во время экспозиции исследуемого вещества или в течение постэкспозиционного
периода, если таковой используется. В культурах, которые обрабатывают блокатором цитокенеэа,
это достигается при анализе двуядерных клеток. В отсутствии блока цитокинеза важно показать, что
анализируемые клетки прошли клеточное деление во время или после воздействия исследуемым
веществом. Для всех протоколов важно показать, что пролиферация клеток была как в контрольных,
так и опытных культурах. Степень индуцированных исследуемым веществом цитотоксичности и
цитостатичности должны быть определена в культурах (или параллельных культурах), в которых
анализируют микроядра.
4 Описание метода
4.1 Материалы
Используют первичные культуры лимфоцитов периферической крови человека [6. 20. 43. 44] и
ряд клеточных линий грызунов, таких как СНО. V79, CHL/1U и L5178Y (19, 20. 21, 22, 23. 26. 27. 28. 29,
31]. Использование других клеточных линий и типов должно быть научно обосновано по критериям,
описанным в разделе «Критерии приемлемости». Так как спонтанная частота микроядер влияет на
2