ГОСТ 32635-2014
М Е Ж Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н Ы ЙС Т А Н Д А Р Т
МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЯ ПО ВОЗДЕЙСТВИЮ ХИМИЧЕСКОЙ ПРОДУКЦИИ
НА ОРГАНИЗМ ЧЕЛОВЕКА
Микроядерный тест на клетках млекопитающих in vitro
OECD guidelines for the testing of chemicals.
In Vitro Mammalian Cell Micronucleus Test
Дата введения - 2015-06-01
1Область применения
Тесты in vitro обычно требуют использования экзогенного источника метаболической активации, за
исключением клеток, которые метаболически компетентны в отношении исследуемых соединений.
Система метаболической активации не может полностью воспроизводить условия, присутствующие у
млекопитающих in vivo. Следует тщательно избегать условий, которые могут привести к результатам, не
отвечающим реальной мутагенности. Позитивные результаты, не отвечающие реальной
мутагенности, могут возникать вследствие изменения pH. осмотической концентрации, высокого уровня
токсичности [41, 42]. Если исследуемое вещество вызывает изменение pH среды во время введения в
культуру. pH должно быть скорректирована, предпочтительно забуферив исходный раствор. Таким
образом, все объемы при всех концентрациях и все контроли будут иметь одинаковую pH.
Для анализа индукции микроядер необходимо, чтобы митозы были как в опытных, так и
контрольных культурах. Для анализа микроядер наиболее информативна является стадия, при
которой клетки прошли один митоз во время или после воздействия исследуемого вещества.
2 Термины и определения
2.1 анеугон (Aneugen):любое соединение или процесс, которые, взаимодействуя с
компонентами цикла деления митотических и мейотических клеток, приводят к анеуплоидии в клетках
или организмах.
2.2 анеуллоидия (Aneuptoidy): любое отклонение от нормального диплоидного (или
гаплоидного) числа хромосом на одну или более хромосом, но не на полный набор хромосом
(полиплоидия).
2.3 апоптоз (Apoptosis): запрограммированная клеточная гибель, характеризующаяся серией
этапов, ведущих к дезинтеграции клеток в мембранно-связанные частицы, которые затем
элиминируются затем фагоцитозом или выбросом.
2.4 генотоксический (Genotoxic): общий термин, охватывающий все типы повреждений ДНК
или хромосом, включающий разрывы, аддукты, перестройки, мутации, хромосомные аберрации и
анеупломдию. Не все типы генотоксических эффектов приводят к мутациям или стабильным
хромосомным нарушениям.
2.5 индекс пролиферации при цитокинетическом блоке (CBPI) (Cytokinesis-Block Proliferation
index (CBPI)): доля клеток второго деления в обработанной популяции относительно контроля без
обработки (см. формулы в Приложении А).
2.6 индекс репликации (Rl) (Replication Index (RI)): доля завершенных циклов клеточного
деления в обработанных культурах по отношению к культурам без обработки в течение периода
экспозиции и восстановления (см. формулы в Приложении А).
2.7 инторфазные клетки (Interphase cells): клетки не в стадии митоза.
2.8 кинетохор (Kinetochore): белок содержащая структура, которая расположена в центромере
хромосомы, с которой во время клеточного деления связаны волокна веретена, позволяющие точно
расходиться дочерним хромосомам к полюсам дочерних клеток.
2.9 клеточная пролиферация (Cell proliferation): увеличение числа клеток в результате
митотического деления клеток.
2.10 кластоген (Clastogen): любое соединение или процесс, которые вызывают структурные
хромосомные аберрации в популяции клеток или организмов.
Издание официальное
1