ГОСТ 32042— 2012
7.3.3Приготовление основных стандартных растворов витаминов В, и В2
Для приготовления основных стандартных растворов витаминов В, и В2берут 0.1 г витамина В,
и 0.01 г витамина В2. Витамины растворяют в дистиллированной воде при нагревании на водяной ба
не до температуры 70°С - 80 °С в мерных колбах вместимостью 100 см’ и 200 см3для витаминов В, и
В2соответственно. Объемы в колбах доводят дистиллированной водой до метки.
Массовые концентрации основных стандартных растворов.
- витамина В, - 1 мг/см3,
- витамина В2- 0.05 мг/см \
Срок хранения основных стандартных растворов витаминов В, и В2в холодильнике при темпе
ратуре 4 °С - 5 °С - не более 2 недель.
7.3.4 Контроль за содержанием витаминов В, и В2в основных стандартных растворах
Контроль за содержанием витаминов в основных стандартных растворах осуществляют слек-
трофотометрически по значениям молярных коэффициентов светопоглощения.
Для этого основные стандартные растворы (см. 7.3.3) разбавляют дистиллированной водой в
объемном соотношении 1 : 49 и измеряют оптическую плотность растворов на спектрофотометре в
кювете толщиной поглощающего свет слоя 10 мм.
Массовую концентрацию витамина Bi или В2. С. мг/см3. в основных стандартных растворах вы
числяют по формуле
C _ C ~ V > D
Vr E l
(3)
где Сел,- массовая концентрация витамина Bi или В2в рабочем стандартном растворе, мг/см3;
V2-
объем разведенного стандартного раствора В, или В2, см3;
D - оптическая плотность витамина В, или В2. е.о.п.;
V,
- объем рабочего стандартного раствора витамина В, или В2. взятый для разведения, см3;
Е
- молярный коэффициент светопоглощения при рабочей длине волны268 нм для витамина Bi
и 445 нм для витамина В2. значение которого соответственно 205 и 324 е.о.п.,’см;
I -
толщина слоя раствора в кювете, см.
7.3.5 Приготовление рабочего стандартного раствора витаминов В, и В2
В мерную колбу вместимостью 50 см3помещают 1 см3и 25 см3основных стандартных растворов
витамина В, и витамина В2(см. 7.3.3). объем доводят дистиллированной водой до метки и перемеши
вают.
Массовые концентрации витаминов в рабочем стандартном растворе составляют 20 мкг/см3- для
витамина В, и 25 мкг/см3- для витамина В2.
Рабочий стандартный раствор готовят в день проведения испытаний.
7.4 Проведение испытания
7.4.1 Экстракция витаминов В, и В2
Для определения содержания витамина Bi и В2в премиксе проводят два параллельных испыта
ния, начиная со взвешивания анализируемой пробы.
(1.000 ± 0.002) г анализируемой пробы премикса помещают в коничес-кую колбу со шлифом
вместимостью 100 см3и приливают 10 см3раствора соляной кислоты молярной концентрации с(НС1) =
0.01 моль/дм3.
Колбу ставят на магнитную мешалку с включением нагрева. Перемешивание и нагрев
осуществляют в течение 10 мин. Полученную суспензию переливают в центрифужную пробирку и
центрифугируют при 5000-6000 об/мин в течение 3 мин. Центрифугат сливают в мерную колбу
вместимостью 25 см3. Коническую колбу с остатком раствора ополаскивают небольшим количеством (4-
5 см3) раствора соляной кислоты молярной концентрации с(НС1) = 0.01 моль/дм3, сливают раствор в
центрифужную пробирку и снова центрифугируют. Центрифугат соединяют с первым в той же мерной
колбе. Промывание центрифугированием повторяют 2-3 раза, каждый раз сливая промывные воды в ту же
колбу. После этого раствор в мерной колбе доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают.
Полученный раствор фильтруют или дополнительно центрифугируют для очищения от
механических примесей и взвешенных частиц. Приготовленный раствор используют для
хроматографирования.
7.4.2 Хроматографирование
Хроматографирование осуществляют при следующих условиях;
- колонка размером 4 * 150 мм. заполненная сорбентом;
7